Determination of Sulfonamide Residues in Chicken Muscle by Agilent Bond Elut QuEChERS AOAC Kit and HPLC-FLD

Význam tématu

Sulfonamidy jsou širokospektrá veterinární antibiotika využívaná k prevenci a léčbě infekcí v živočišné produkci. Jejich rezidua v potravinách představují zdravotní rizika pro konzumenty a mohou přispívat k rozvoji rezistence bakterií.

Cíle a přehled studie / článku

Studie si klade za cíl vyvinout a validovat kvantitativní víceúčelovou metodu pro detekci devíti sulfonamidů v kuřecím mase. Metoda kombinuje rychlou extrakci a čištění založené na QuEChERS AOAC, precolumn derivatizaci fluorescaminem a separaci pomocí HPLC s fluorescenční detekcí.

Použitá metodika a příprava vzorku

Vzorky kuřecího masa byly homogenizovány a následně extrahovány acetonitrilem s 1 % kyseliny octové za přítomnosti soli MgSO4/NaOAc (QuEChERS AOAC). Po centrifugaci došlo k čištění rozptýlenou SPE (PSA, C18EC, MgSO4). Extrakt byl odpařen, rekonstituován v 0,05 M acetátovém pufru pH 3,5 a derivatizován 0,02 % roztokem fluorescaminu v acetonu po dobu 60 min.

Použitá instrumentace

Analýza proběhla na HPLC Agilent 1200 Series vybavené binární pumpou a fluorescenční detekcí (Ex 405 nm, Em 495 nm). Kolona: Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18 (4,6 × 75 mm, 3,5 μm). Data zpracováno pomocí softwaru HPLC 2D Chemstation.

Hlavní výsledky a diskuse

Kalibrační křivky pro rozsah 10–400 ng/g vykázaly výbornou linearitu (R2 ≥ 0,9991). Mez detekce se pohybují mezi 0,02–0,39 ng/g, mez stanovení mezi 0,25–1,30 ng/g – výrazně pod legislativními limity. Obnovy sulfonamidů v kuřecím mase byly 76,8–95,2 % s RSD 1,5–4,7 % při 50–150 ng/g. Derivatizace fluorescaminem proběhla optimálně během 60 min bez interferencí izu matice.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda nabízí rychlou, robustní a cenově efektivní analýzu s minimální spotřebou organických rozpouštědel. Je vhodná pro rutinní kontrolu reziduí sulfonamidů v potravinářských laboratořích a splňuje požadavky QA/QC i regulačních orgánů.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se integrace s LC-MS/MS pro vyšší selektivitu a možnost současného stanovení širšího spektra látek. Trendem je miniaturizace a automatizace QuEChERS postupů pro větší propustnost analýz a vývoj on-site rychlotestů pro průběžný monitoring v terénu.

Závěr

Popsaná HPLC-FLD metoda v kombinaci s QuEChERS extrakcí a precolumn derivatizací splňuje požadavky na citlivost, přesnost a opakovatelnost pro stanovení sulfonamidů v kuřecím mase. Je doporučena pro regulační i rutinní laboratoře zaměřené na kontrolu reziduí.

Reference

1. A. Posyniak et al., J. Chromatogr. A 1087 (2005) 259–264.
2. I. Pecorelli et al., J. Chromatogr. A 1032 (2004) 23–29.
3. A. R. Long et al., J. Agric. Food Chem. 38 (1990) 423–426.
4. D. Kim et al., Bull. Korean Chem. Soc. 23 (2003).
5. V. Gamba et al., Anal. Chim. Acta 637 (2009) 18–23.
6. S. Wang et al., Food Addit. Contam. 23 (2006) 362–384.
7. X. Wang et al., J. Agric. Food Chem. 55 (2007) 2077.
8. L. Zhao, J. Stevens, Agilent Tech. publikace 5990-4248EN.
9. G. Stoev, A. Michailova, J. Chromatogr. A 871 (2000) 37–42.
10. N. Takeda, Y. Akiyama, J. Chromatogr. B 558 (1991) 175–180.