Determination of Melamine Residue in Milk Powder and Egg Using Agilent SampliQ Polymer SCX Solid Phase Extraction and the Agilent 1200 Series HPLC/UV

Význam tématu

Měření melaminu v potravinách je klíčové pro zajištění bezpečnosti spotřebitelů a plnění přísných regulačních limitů v mléčných výrobcích a vejcích. Incidenty z roku 2008 ukázaly nutnost spolehlivých analytických metod pro detekci zbytků melaminu.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo optimalizovat a validovat metodu stanovení melaminu v mléčném prášku a vejcích podle čínské normy GB/T 22388-2008, využívající polymerovou SCX SPE extrakci a detekci HPLC/UV.

Použitá metodika a instrumentace

Postup přípravy vzorku:

• Homogenizace vzorku a extrakce pomocí 1 % trichloroctanu a acetonitrilu
• Sonikace 10 min, otřásání 10 min a centrifugace při 4000 ot./min
• Filtrace a doplnění objemu extraktu na 25 mL

Čištění pomocí SPE:

• Kondicionování kartridže 3 mL methanolu a 5 mL vody
• Naložení 10 mL připraveného vzorku
• Vymyvání 3 mL vody a 3 mL methanolu
• Sušení pod vakuem
• Eluce 6 mL 5 % hydroxidu amonného v methanolu
• Koncentrace eluátu dusíkem, rekonstituce v mobilní fázi a filtrace 0,45 µm membránou

HPLC podmínky:

• Agilent 1200 Series s DAD detektorem
• Kolona ZORBAX SB-C8 5 µm, 250×4,6 mm
• Isokratická eluce acetonitril–pufr 15:85, 1,0 mL/min, 40 °C
• Detekce při 240 nm, injekční objem 20 µL

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda prokázala lineární oblast 1–20 mg/kg s korelačním koeficientem 0,9999 a detekční mez 10 µg/kg. Obnova melaminu byla následující:

• Mléčný prášek: 84,5–86,7 % (RSD 1,18–2,83 %)
• Vejce: 93,0–95,7 % (RSD 2,01–3,00 %)

Interference z matrice byly minimální, nevplývaly na kvantifikaci.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda je jednoduchá, robustní a plně vyhovuje regulačním požadavkům. Lze ji snadno nasadit v kontrolních laboratořích a jako předčištění pro vysoce selektivní LC/MS/MS nebo GC/MS analýzy.

Budoucí trendy a možnosti využití

Možné směry dalšího vývoje:

• Automatizace SPE a online integrace s HPLC
• Rozšíření na více cílových kontaminantů v jednom běhu
• Nasazení LC-MS/MS pro vyšší citlivost a selektivitu
• Minimalizace objemů rozpouštědel a ekologičtější protokoly

Závěr

Agilent SampliQ SCX SPE ve spojení s HPLC/UV představuje efektivní, citlivou a reprodukovatelnou metodu pro stanovení melaminu v mléčném prášku a vejcích. Výsledky splňují požadavky čínské normy a ukazují minimální interferenci matrice.

Reference

• GB/T 22388-2008 Determination of Melamine in Raw Milk and Dairy Products