Rapid Determination of Melamine in Liquid Milk and Milk Powder by HPLC on the Acclaim Mixed-Mode WCX-1 Column with UV Detection

Význam tématu

Melamin se používá v průmyslu plastů a hnojiv, ale byl zneužit k navyšování zdánlivého obsahu bílkovin v mléčných produktech. Kontaminace sušeného i tekutého mléka melaminem vyvolala závažné zdravotní problémy, zejména u kojenců. Rychlá a spolehlivá analýza melaminu je klíčová pro zajištění bezpečnosti potravin.

Cíle a přehled studie

Cílem bylo vyvinout jednoduchou, rychlou a citlivou HPLC metodu s UV detekcí pro stanovení melaminu v tekutém mléce a sušeném mléčném prášku. Separace probíhá na kolóně Acclaim Mixed-Mode WCX-1 s mobilní fází acetátového pufru a acetonitrilu. Analýza je dokončena do deseti minut.

Použitá metodika a instrumentace

Pro přípravu vzorků byly optimalizovány dvě postupy:

• Sušené mléko – extrakce vodou, precipitace 3 % kyselinou octovou, centrifugace, filtrace 0,2 μm filtrem.
• Tekuté mléko – přímé přidání kyseliny octové, uchování, centrifugace a filtrace.

Chromatografické podmínky:

• Kolóna Acclaim Mixed-Mode WCX-1 (4,6 × 250 mm, 5 μm) se strážnou kolónou (4,3 × 10 mm).
• Mobilní fáze – acetátový pufr (10 mM HAc + 10 mM NH4Ac, pH 4,3) a CH3CN v poměru 8 : 2.
• Teplota kolony 30 °C, průtok 1,0 mL/min, objem injekce 20 μL, detekce UV při 240 nm.
• Instrumentace – Dionex UltiMate 3000 HPLC systém s UV-vis detektorem nebo PDA detektorem, ultrazvuková lázeň, centrifuga, minishaker.

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda vykazuje lineární rozsah 0,05–40 μg/mL (r = 0,9999), opakovatelnost RSD 0,04 % pro retenční čas a 0,47 % pro plochu píku, detekční limit 0,015 μg/mL. Příprava vzorků bez SPE zkracuje dobu a snižuje náklady. Srovnání s RP-PIC metodou na C18 koloně potvrdilo shodu výsledků. U citlivějších případů detekce lze použít PDA detektor k vyloučení falešných pozitiv.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda umožňuje rychlou (do 10 minut), citlivou a reprodukovatelnou kontrolu melaminu v mléčných výrobcích bez nutnosti časově náročného čištění SPE. Je vhodná pro rutinní QA/QC v mlékárenském průmyslu.

Budoucí trendy a možnosti využití

Integrace s hmotnostní spektrometrií pro další potvrzení identity látek, rozšíření matice na jiné potraviny, automatizace přípravy vzorků a využití vysoce kapacitních pufrů pro složitější vzorky.

Závěr

Předložená HPLC-UV metoda na kolóně Acclaim Mixed-Mode WCX-1 nabízí rychlé, přesné a citlivé stanovení melaminu v tekutém mléce a mléčném prášku. Jednoduchá příprava vzorků a vysoká propustnost metody ji předurčují pro rutinní kontroly bezpečnosti potravin.

Reference

1. Filigenzi MS et al. Rapid Commun Mass Spectrom 2007;21(24):4027–4032
2. Ding T et al. Se Pu 2008;26(1):6–9
3. Kim B et al. J AOAC Int 2008;91(2):408–413
4. Wang L et al. Dionex LPN 1991-01 10/07
5. GB/T 22388 2008 – stanovení melaminu v syrovém mléce
6. GB/T 22400 2008 – rychlá HPLC metoda pro syrové mléko
7. Dionex Product Manual Acclaim Mixed-Mode WCX-1 Column