A Robust and Sensitive Instrument for Quantification of N-Nitroso Argatroban impurity at 0.3 ppm in Argatroban Drug Product

Význam tématu

Nitrosaminy jsou rizikové nečistoty, které se mohou tvořit v průběhu výroby či skladování léčiv obsahujících argatroban. Jejich detekce a kvantifikace v nízkých koncentracích (≤0,3 ppm) je klíčová pro zajištění bezpečnosti a kvality farmaceutických produktů.

Cíle a přehled studie

Hlavním cílem studie bylo vyvinout robustní a citlivou analytickou metodu pro měření nečistoty N-nitroso argatrobanu v hotovém formě léku při nákladném limitu kvantifikace 0,3 ppm, minimalizovat vliv matric a zajistit přijatelné výtěžky přídavného testu.

Použitá metodika

• Přístup vzorkové přípravy zahrnoval extrakční protokol s minimální koncentrací vzorku pro zvýšení efektivity redukce rušivých matričních vlivů.
• Chromatografie probíhala na kolonce Acquity UPLC HSS T3 při použití systému Acquity UPLC H-Class Plus.
• Detekce byla realizována tandemovou hmotnostní spektrometrií (MS/MS) v režimu MRM s podporou RADAR skenů, umožňujících souběžné pořizování plnoskenných dat a MRM bez ztráty citlivosti.

Použitá instrumentace

• Hmotnostní spektrometr Xevo TQ-S Cronos
• Kapalinový chromatograf Acquity UPLC H-Class Plus
• Chromatografická kolonka Acquity UPLC HSS T3

Hlavní výsledky a diskuse

• Metoda dosáhla LOQ 0,3 ppm s vynikajícím poměrem signál/šum (>1000) při 0,05 ppm N-nitroso argatrobanu.
• Lineární rozsah měření se pohyboval od 0,05 do 50 ppm (R2 > 0,99).
• Limit detekce byl stanoven pod 0,005 ppm.
• Test opakovaného přídavku (spiked recovery) prokázal průměrnou návratnost 94 % (rozmezí 70–120 %).
• RADAR skenování umožnilo oddělení API od NDSRI, což přispělo k lepší robustnosti metody a ochraně hmotnostního spektrometru před kontaminací.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda poskytuje spolehlivou, citlivou a rychlou analýzu nečistot N-nitroso argatrobanu, což je zásadní pro pravidelné kontroly kvality výrobních šarží a pro zajištění souladu s regulačními požadavky FDA.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Další optimalizace vzorkové přípravy pro různé farmaceutické matrice.
• Integrace vyšších rozlišení hmotnostních spektrometrů pro ještě nižší LOD.
• Využití pokročilých režimů datového získávání pro širší profilaci NDSRI v komplexních vzorcích.

Závěr

Navržená metoda s využitím Xevo TQ-S Cronos a Acquity UPLC HSS T3 nabízí robustní a vysoce citlivý nástroj pro kvantifikaci N-nitroso argatrobanu v léčebných produktech. Splňuje přísné požadavky na LOQ 0,3 ppm, vysokou linearitu a spolehlivou návratnost testů, což podporuje bezpečnost pacientů a soulad s předpisy.