HPLC
ZaměřeníPotraviny a zemědělství
VýrobceThermo Fisher Scientific
Význam tématu
Stanovení vitamínů rozpustných ve vodě ve sportovních nápojích je klíčové pro kontrolu nutričních parametrů a bezpečnosti spotřebitelů. UHPLC metoda používající reverzní fázi umožňuje rychlou analýzu díky dobré rozpustnosti těchto látek v mobilní fázi a jejich silným UV absorpčním vlastnostem.
Cíle a přehled studie / článku
Cílem bylo demonstrovat schopnost kombinace Acclaim PolarAdvantage II kolony a Vanquish Flex Binary UHPLC systému pro efektivní separaci sedmi vodou rozpustných vitamínů s vynikající lineárností, reprodukovatelností, rozlišením a vysokými recoveries. Dále bylo ověřeno, že systém zajišťuje přesnost retenčních časů díky inovativním čerpadlům a automatickým procesům.
Použitá metodika a instrumentace
- Kolona: Acclaim PolarAdvantage II 100×3 mm, částice 2,2 μm
- Mobilní fáze A: 0,015 % kys. mravenčí ve vodě, B: metanol/acetonitril (20:80 v/v)
- Gradient: 100 % A (0–2 min), lineární do 45 % A (2–6 min), 100 % B (6–7 min), návrat na 100 % A (7–10 min)
- Průtok: 0,5 mL/min, teplota kolony a předehřívače: 50 °C
- Próbování: 5 μL, detekce DAD při 210 nm s 2 μL LightPipe Flow Cell
- Systém: Vanquish Flex Binary (Binary Pump F, Split Sampler FT, Column Compartment H, Active Pre-heater, DAD HL, Virtuoso vial i.d.)
- Software: Chromeleon 7.2 SR4 MUb
- Příprava vzorků: odplynění ultrazvukem, 1:1 ředění v mobilní fázi A, filtrování (0,45 μm), spike recovery test
Hlavní výsledky a diskuse
- Kompletní rozlišení všech sedmi vitamínů za přibližně 6 min s EP > 1,5.
- Reprodukovatelnost retenčních časů (RSD < 0,3 %) a ploch špiček (RSD < 1,8 %).
- Linearity kalibračních křivek s koeficienty determinace R2 mezi 0,9953 a 0,9983.
- Recoveries ≥ 80 % ve třech různých příchutích sportovních nápojů, minimální matriční interferenční efekty.
- Naměřené koncentrace vitamínů se shodují s údaji na etiketách (kromě vitamínu B12 pod LLOQ).
Přínosy a praktické využití metody
Vysoce rychlá a citlivá metoda vhodná pro rutinní analýzu vitamínových doplňků a sportovních nápojů. Robustnost širokého pH rozsahu a vodní složky mobilní fáze zajišťuje stabilitu sloučenin a dlouhou životnost kolony.
Budoucí trendy a možnosti využití
Možnosti rozšíření na další vitamíny, minerály a biologicky aktivní látky. Integrace hmotnostní spektrometrie pro zvýšení selektivity a citlivosti, automatizace přípravy vzorků a on-line monitorování kvality výroby v potravinářském a farmaceutickém průmyslu.
Závěr
Kombinace kolony Acclaim PolarAdvantage II a Vanquish Flex Binary UHPLC poskytuje rychlou, reprodukovatelnou a vysoce citlivou metodu pro stanovení vodou rozpustných vitamínů ve sportovních nápojích, splňující požadavky QA/QC a doplňující moderní analytické potřeby.
Obsah byl automaticky vytvořen z originálního PDF dokumentu pomocí AI a může obsahovat nepřesnosti.