Analysis of Naringin and Neohesperidin in Fructus Aurantii

Význam tématu

Fructus Aurantii je tradiční surovinou bohatou na flavanone-7-O-glykosidy, zejména naringin a neohesperidin, které prokazují řadu biologických aktivit. Spolehlivá analýza těchto sloučenin je klíčová pro kontrolu kvality fytoterapeutik, potravinových doplňků a farmaceutických přípravků.

Cíle a přehled studie

Cílem prezentované aplikace je vyvinout a validovat jednoduchou, reprodukovatelnou a citlivou metodu reverzní fázové kapalinové chromatografie pro kvantifikaci naringinu a neohesperidinu v extraktu Fructus Aurantii.

Použitá metodika a instrumentace

Pro úpravu vzorku byla zvolena extrakce 50% metanolem za refluxu. Postup:

1. Odvážit 0,2 g drceného Fructus Aurantii.
2. Přidat 50 mL 50% metanolu, uzavřít a znovu zvážit.
3. Refluxovat 1,5 hodiny, po vychladnutí doplnit 50% metanol na původní hmotnost.
4. Protřepat, filtrovat a 10 mL filtrátu doplnit metanolem na 25 mL.
5. Přenést do vzorkové lahvičky a aplikovat do LC.

Chromatografické podmínky:

• Kolona: Shim-pack VP-ODS, 250 × 4,6 mm, 5 µm.
• Mobilní fáze: acetonitril : voda (20 : 80) s fosforečnou kyselinou, pH 3,0.
• Průtok: 1,0 mL/min.
• Teplota kolony: 40 °C.
• Injekční objem: 10 µL.
• Detekce: UV při 283 nm.

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda umožnila dobrou separaci naringinu a neohesperidinu s ostrými vrcholy a stabilními retenčními časy. Porovnání chromatogramu standardu a vzorku prokázalo spolehlivou identifikaci a kvantifikaci obou sloučenin v koncentracích okolo 80 µg/mL.

Přínosy a praktické využití metody

• Rychlá a jednoduchá úprava vzorku bez nutnosti složitého čištění.
• Vysoká opakovatelnost a reprodukovatelnost měření.
• Vhodné pro rutinní kontrolu kvality surovin a extraktů v laboratořích QA/QC.

Budoucí trendy a možnosti využití

Metodu lze dále rozvinout přechodem na UHPLC pro zkrácení analytického času nebo rozšířením detekce o hmotnostní spektrometrii pro zvýšení selektivity. Další aplikací je integrace do metabolomických studií citrusových flavonoidů.

Závěr

Navržená reverzní fázová LC metoda s jednoduchým zpracováním vzorku je robustní a spolehlivá pro kvantifikaci naringinu a neohesperidinu ve Fructus Aurantii. Poskytuje rychlé výsledky vhodné pro běžnou laboratorní praxi.