Spotřební materiál, HPLC, LC kolony
ZaměřeníFarmaceutická analýza
VýrobceShimadzu
Význam tématu
Stanovení syringinu, glykozidu sinapylalkoholu, v bylinných preparátech je klíčové pro zajištění kvality a účinnosti tradičních i moderních fytoterapeutik. Cílená analýza této sloučeniny umožňuje kontrolu surovin, detekci podvodů při označování produktů a podporuje farmakologický výzkum biologických účinků.
Cíle a přehled studie
Hlavním cílem bylo vyvinout a ověřit rychlou reverzní fázovou HPLC metodu pro kvantifikaci syringinu v rostlinném materiálu. Studie zahrnovala optimalizaci extrakce, chromatografických podmínek a popis validačních parametrů pro komerčně dostupný sloupek Shim-pack VP-ODS.
Použitá metodika a instrumentace
Měření proběhlo na HPLC sestavě vybavené UV detektorem:
- Kolona: Shim-pack VP-ODS (250 × 4,6 mm, 5 μm)
- Mobilní fáze: voda (A) : methanol (B) v poměru 82 : 18
- Průtok: 1,0 ml/min
- Teplota kolony: 30 °C
- Objem injekce: 10 μl
- Detekce: UV při 265 nm
- LabTotalTM vial pro LC/LCMS
Příprava vzorku zahrnovala:
- Mletí 2 g sušené byliny na prášek
- Extrahování 50 mL 50% methanolu ultrazvukem (250 W, 40 kHz, 30 min)
- Úpravu objemu podle hmotnosti a filtrace
- Odpaření a opětovné rozpuštění v 50% methanolu
- Čištění na neutrální alumina kolonce (100–200 mesh), eluace 90 ml 50% methanolu
- Evaporace eluátu, doplnění do 2 ml a filtrace před analýzou
Hlavní výsledky a diskuse
Optimalizované podmínky vedly k reprodukovatelnému retenčnímu času syringinu a dostatečné separaci od dalších složek matice. Kalibrační přímka pro koncentrace kolem 20 μg/ml byla lineární, s nízkou odchylkou. Chromatogram standardní směsi objevil jediný výrazný vrchol syringinu, stejně jako vzorky byliny, což potvrzuje selektivitu a citlivost metody.
Přínosy a praktické využití metody
Metoda umožňuje laboratorní kontrolu kvality bylinných extraktů během výroby i ve finálních produktech. Díky jednoduché přípravě vzorku a standardním chromatografickým poměrům je varianta snadno implementovatelná v rutinních laboratořích QA/QC.
Budoucí trendy a možnosti využití
V dalším vývoji lze metodu adaptovat pro simultánní stanovení dalších fenylpropanoidů pomocí gradientní eluce a MS detekce. Miniaturizace extrakčního kroku (např. mikroextrakce do pevné fáze) a automatizace přípravy vzorků podpoří vyšší kapacitu a rychlost analýzy.
Závěr
Vyvinutá reverzní fázová HPLC metoda pro analýzu syringinu je rychlá, citlivá a reprodukovatelná. Uplatnění nachází v kontrole kvality fytopreparátů, podpoře výzkumu a garanci složení bylinných produktů.
Reference
- Shimadzu Corporation. Application Note ERAS-1000-0061: Analysis of Syringin in Herbal medicine. First Edition, Mar. 2023.
Obsah byl automaticky vytvořen z originálního PDF dokumentu pomocí AI a může obsahovat nepřesnosti.