Modernization of the Acetaminophen USP Monograph Gradient HPLC Method for Impurities using USP <621> Guidelines and MaxPeak Premier HPS Technology

Význam tématu

Modernizace standardních metod HPLC pro stanovení organických nečistot v acetaminofenu přináší významné úspory času a rozpouštědel, podporuje rychlejší uvolnění farmaceutických šarží a optimalizuje provozní náklady laboratoří při zachování validovaných kritérií kvality dle USP.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem studie bylo aktualizovat gradientní HPLC metodu dle monografie USP pro analýzu organických nečistot v acetaminofenu. Modernizace proběhla v souladu s pokyny USP <621> a využitím Waters Column Calculatoru. Původní metoda s 5 µm částicemi byla převedena na sloupec s 2,5 µm částicemi, přičemž se sledovalo splnění kritérií systémové způsobilosti a výpočet úspor času a spotřeby mobilní fáze.

Použitá metodika a instrumentace

Vzorky a standardy se připravily v metanolu dle pokynů monografie. Pro původní metodu se použil HPLC systém 1260 Infinity s UV detektorem při 254 nm a kolona Zorbax Eclipse Plus C8 (4,6×250 mm, 5 µm). Modernizovaná analýza proběhla na ACQUITY Arc s PDA detektorem a kolonu XBridge Premier BEH C8 (4,6×150 mm, 2,5 µm). Gradientní složení fází A a B i teplotní a průtoková nastavení se automaticky přepočetla pomocí kalkulátoru podle USP <621>.

Použitá instrumentace

• HPLC systém: Agilent 1260 Infinity LC s UV detektorem (původní metoda)
• UHPLC systém: Waters ACQUITY Arc s PDA detektorem 2998
• Kolony: Zorbax Eclipse Plus C8, 5 µm, 4,6×250 mm; XBridge Premier BEH C8, 2,5 µm, 4,6×150 mm
• Software: Empower 3 Feature Release 4

Hlavní výsledky a diskuse

Systémová způsobilost původní metody potvrdila požadované hodnoty: tailed faktor ≤2, rozlišení ≥2,0 mezi acetaminofenem a nečistotou B a ≥1,5 mezi nečistotami B a C, RSD ≤5 % pro nečistotu D. Modernizovaná metoda vykázala obdobné hodnoty (tailed faktor 1,08; rozlišení 17,0 a 3,5; RSD 0,50 %), přičemž doba běhu se zkrátila z 73 na 36 minut. Celková doba analýzy šarže poklesla ze 22 na 11 hodin a spotřeba mobilní fáze byla snížena z 1183 na 700 mL.

Přínosy a praktické využití metody

• Poloviční doba analýzy a značné snížení spotřeby rozpouštědel
• Možnost aplikace na běžných HPLC systémech bez nutnosti extrémního tlaku
• Minimální riziko chyb při přepočtech díky využití software
• Rychlejší uvolňování výrobních šarží a snížení provozních nákladů

Budoucí trendy a možnosti využití

Modernizace monografických metod lze rozšířit na další farmaceutické produkty, čímž se kumulují úspory. Trendem je přechod na kolony s částicemi menšími než 2 µm v kombinaci s LC systémy s nízkou dispersí a automatizovanými nástroji pro výpočty. Dále se očekává integrace procesní kontroly v reálném čase a rozšíření škály aplikací UHPLC v GMP prostředí.

Závěr

Aktualizace gradientní HPLC metody dle USP monografie pro stanovení organických nečistot v acetaminofenu prokázala významné zkrácení analýzy a snížení spotřeby mobilní fáze při zachování požadovaných parametrů kvality. Využití pokynů USP <621> spolu s Waters Column Calculator usnadňuje modernizaci bez nákladných chyb a opětovné validace.

Reference

1. USP monografie Acetaminophen, přístup 16. 12. 2022
2. USP General Chapter <621>, přístup 16. 12. 2022