Modernizing the USP Acetaminophen and Caffeine Tablets HPLC Method Following the Revised USP <621> Guidelines

Význam tématu

HPLC analýza acetaminofenu a kofeinu je klíčová pro kontrolu kvality lékových forem. Tradiční USP monografie používají 5–10 μm TPP kolony, což vede k delším dobám analýzy a vyšší spotřebě mobilní fáze. Modernizace těchto metod přináší úsporu času, rozpouštědel a nákladů.

Cíle a přehled studie

Účelem této studie bylo přepracovat USP metodu pro tablety s acetaminofenem a kofeinem tak, aby byla kompatibilní s menšími částicemi v kolónách (3,5 μm ZORBAX Eclipse Plus C18 a 4 μm InfinityLab Poroshell 120 EC-C18) podle revidované směrnice USP <621> bez nutnosti revalidace. Metoda byla optimalizována tak, aby zachovala analytické parametry a zkrátila dobu a spotřebu fáze.

Použitá metodika

Metoda vychází z isokratického režimu: mobilní fáze metanol, kyselina octová a voda (28:3:69), tok 2–2,9 mL/min, teplota 45 °C, detekce UV při 275 nm (pro některé kolony 254 nm). Tok a objem injekce byly upraveny podle vzorců F2 = F1 × [(dp1 × dc2²)/(dp2 × dc1²)] a V2 = V1 × [(L2 × dc2²)/(L1 × dc1²)]. Standardní roztoky acetaminofenu, kofeinu a benzoové kyseliny byly připraveny dle monografie.

Použitá instrumentace

Agilent 1260 Infinity II LC systém s binárním pumpem (G7112B), multisamplerem (G7167A), multikolonovým termostatem (MCT), 4-pozicovým ventilem, DAD detektorem WR (G7115A) a softwarem OpenLab CDS 2.8. Použity 0,12 mm tubing, 10 mm standardní flow bunka a dlouhoživotná deuterová lampa.

Hlavní výsledky a diskuse

Obě modernizované kolony (3,5 μm ZORBAX Eclipse Plus C18 a 4 μm Poroshell 120 EC-C18) splnily systémové požadavky: rozlišení R > 1,4, tzv. Tailing Factor ≤ 1,2 a %RSD < 2. Chromatogramy prokázaly ostré a dobře oddělené píky. Doba analýzy se zkrátila z 4 na 2 a 1,2 min, spotřeba mobilní fáze klesla z 8 na 5,8 a 3 mL. Úspora času činila 50–70 %, rozpouštědel 27,5–62,5 %.

Přínosy a praktické využití metody

Zavedení menších částic v kolónách nabízí rychlejší kontrolu kvality, nižší provozní náklady a menší environmentální zátěž. Metoda je snadno přenositelná a vyhovuje revidované normě USP <621>.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další úspory rozpouštědel lze dosáhnout použitím užších ID kolony (3,0 mm). Očekává se širší přechod k UHPLC, rozšíření modernizace na další USP monografie, integrace s hmotnostní spektrometrií a plná automatizace analytických postupů.

Závěr

Modernizace USP metody pro acetaminofen a kofein pomocí menších částic kolony je proveditelná bez revalidace, splňuje všechny systémové požadavky a přináší výrazné úspory času a mobilní fáze.

Reference

• USP Harmonized Standards Home Page. Supplement USP Stage 4 Harmonization, Official, December 1, 2022.
• USP Monographs Acetaminophen and Caffeine Tablets, United States Pharmacopeia: 2024.
• Fu, R.; Grover, M.; Freeman, R.; Long, W. Understanding the Latest Revisions to USP <621>. Agilent Technologies white paper, 5994-6618EN, 2023.
• Fu, R. Modernizing the USP Ceftizoxime Sodium HPLC Method Following the Revised USP <621> Guidelines. Agilent Technologies application note, 5994-7819EN, 2024.