LC/HRMS, LC/MS, LC/MS/MS, LC/Orbitrap
ZaměřeníVýrobceThermo Fisher Scientific
Význam tématu
Masová spektrometrie s vysokým rozlišením a hmotnostní přesností se stala klíčovou metodou pro analýzu komplexních biologických vzorků, včetně plného proteomu, peptidů, proteinových komplexů a malých molekul.
Cíle a přehled studie / článku
Tento dokument představuje technické specifikace a hlavní vlastnosti Orbitrap Ascend Tribrid hmotnostního spektrometru od Thermo Fisher Scientific, navrženého k řešení náročných analytických výzev v proteomice, strukturní analýze bílkovin a analýze malých molekul.
Použitá instrumentace
- Orbitrap Ascend Tribrid MS s revoluční architekturou: QR5 kvadrupól, přední a zadní iontové vícepolé, C-trap, ultra-vysokofrekvenční Orbitrap a dvoukomorový lineární iontový trap
- Ionizační zdroje: HESI (1–2000 µL/min), Auto-Ready pro bezobslužnou kalibraci, EASY-ETD/PTCR pro ion-ion reakce, UVPD se 213 nm laserem
- Volitelné rozšíření: FAIMS Pro Duo pro plynovou frakcionaci, HMR n+ pro hmotnostní rozsah až m/z 16 000
- Řídící a zpracovatelský software: Xcalibur, instrument control, Proteome Discoverer, Compound Discoverer a další moduly pro top-down i bottom-up proteomiku
Hlavní výsledky a diskuse
- Vysoká citlivost a nízké meze detekce díky Active Ion Management (AIM+) ve spojení s High-Capacity Transfer Tube a modifikovaným iontovým trychtýřem (EDIF)
- Rozlišení až 480 000 FWHM při m/z 200, hmotnostní přesnost <1 ppm (interní kalibrace)
- MS/MS skenování až 45 Hz v Orbitrapu a 50 Hz v lineárním iontovém trapu se současnou paralelizací MS a MSn
- Široké spektrum fragmentačních technik: CID, HCD, ETD/EThcD/ETciD, UVPD s detekcí v Orbitrapu či iontovém trapu
- Real-Time Search a TurboTMT zvyšují rychlost a přesnost kvantifikace TMT experimentů
Přínosy a praktické využití metody
- Univerzální platforma pro kvantitativní proteomiku s vysokou hloubkou pokrytí plného proteomu
- Charakterizace nativních proteinových komplexů a studium vyšších řádů struktury bílkovin
- Analýza malých molekul a metabolitů s vysokou robustností a reprodukovatelností
- Automatizovaná a uživatelsky přívětivá kalibrace přispívá k vyšší dostupnosti v rutinních QA/QC laboratořích
Budoucí trendy a možnosti využití
- Integrace umělé inteligence a strojového učení pro pokročilou optimalizaci sběru dat a analýzu spekter
- Další rozšíření hmotnostního a rozlišovacího rozsahu, včetně rychlejších MSn cyklů
- Větší propojení s online separačními technikami (LC, FAIMS, ion mobility) pro multidimenzionální analýzu
Závěr
Orbitrap Ascend Tribrid MS představuje vysoce výkonnou a všestrannou platformu pro náročné aplikace v proteomice, strukturální biologii a analýze malých molekul. Díky pokročilým iontovým optikám, fragmentačním technikám a integrovaným softwarovým nástrojům umožňuje získat hluboké, přesné a reprodukovatelné výsledky.
Obsah byl automaticky vytvořen z originálního PDF dokumentu pomocí AI a může obsahovat nepřesnosti.