Analysis for Voriconazole Using Fully Automated Sample Preparation LC-MS/MS System and Comparison of Measurement Methods

Význam tématu

Voriconazol je klíčový antifungální lék s úzkým terapeutickým oknem. Jeho účinná hladina v séru se pohybuje mezi 1,0–2,0 µg/mL, při hodnotách nad 4,0–5,0 µg/mL roste riziko nežádoucích účinků včetně hepatotoxicity a očních komplikací. Spolehlivé monitorování koncentrace (TDM) je proto pro klinické laboratoře zásadní. Variabilita výsledků mezi pracovišti zdůrazňuje potřebu standardizovaných a vysoce přesných metod s externím QA/QC.

Cíle a přehled studie / článku

Studie hodnotila účinnost plně automatizovaného systému CLAM-2030 pro přípravu vzorků v kombinaci s LC-MS/MS (Nexera–LCMS-8050) a stabilně izotopovým vnitřním standardem voriconazolu. Cílem bylo porovnat naměřené hodnoty s referenčními hodnotami Japonské společnosti pro TDM Quality Control v rámci 2020 TDM Control Survey pro antiinfekční léčiva.

Použitá metodika a instrumentace

Metodika spočívala v automatizovaném přidání vzorku, vnitřního standardu (13C2,2H3-voriconazol), isopropanolu a extrakčního činidla, následném míchání, filtraci a přímé injekci do LC-MS/MS. Měření probíhalo v režimu MRM s přechody m/z 350,20→281,20 pro hlavní analyt a 355,20→284,20 pro standard. Kalibrační křivka byla připravena pro koncentrace 0,1–10 µg/mL a kvalifikační vzorky o 0,30, 0,75 a 1,75 µg/mL.

• LC systém: Nexera
• MS detektor: LCMS-8050 (ESI pozitivní ionizace)
• Automatická příprava vzorků: CLAM-2030
• Kolona a fázová činidla: DOSIMMUNE™ kit (Alsachim)
• Vnitřní standard: 13C2,2H3-voriconazol (Alsachim)

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda dosáhla lineární kalibrace v rozsahu 0,1–10 µg/mL s korelačním koeficientem >0,9993. Ve třech úrovních QC byly zaznamenány přesnosti 94,1–106,7 % a opakovatelnost s RSD do 9,43 %. V rámci externího kontrolního šetření odpovídaly naměřené koncentrace nízké (1,0 µg/mL), střední (4,0 µg/mL) a vysoké (7,0 µg/mL) úrovni referenčním hodnotám s odchylkou 0,0–2,9 %, což potvrzuje vysokou přesnost navrženého workflow.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda nabízí významné zjednodušení práce díky plné automatizaci, snížení manuálních chyb, zvýšení průtoku vzorků a vysokou robustnost měření. Klinické laboratoře tak mohou zajistit konzistentní TDM voriconazolu s minimální potřebou manuálních zásahů.

Budoucí trendy a možnosti využití

Rozvoj automatizovaných LC-MS/MS systémů pro další skupiny léčiv, širší použití 13C izotopových standardů pro zvýšení stability, integrace digitálních laboratorních workflow a vytváření multiplexních analýz pro komplexní TDM panel.

Závěr

Kombinace plně automatizovaného modulu CLAM-2030, LCMS-8050 a stabilně izotopového internal standardu prokázala výjimečnou přesnost a opakovatelnost při měření voriconazolu. Tento přístup splňuje požadavky externích QA/QC šetření a poskytuje efektivní řešení pro rutinní monitorování hladin antifungální terapie.

Reference

1. Japanese Society of TDM Quality Control. Report on the Results of the 2020 TDM Control Survey for Infectious Disease Therapeutics. 2020.
2. Sano Y. Mass Spectrometry on Drug Metabolism and Pharmacokinetics Studies Intended for Beginners. J Mass Spectrom Soc Jpn. 2016;64(3):81-85.