Quantitation of 8 Nitrosamines in Thiocolchicoside API by LCMS-8045 system

Význam tématu

Thiokolchikosid je syntetický derivát kolchicinu využívaný jako myorelaxans a často aplikovaný při bolesti páteře a svalových křečích. Nitrosaminy představují závažné karcinogenní kontaminanty v léčivých přípravcích, proto je klíčové vyvinout citlivou a spolehlivou analytickou metodu k jejich kontinuálnímu monitorování v souladu s regulačními limity.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo zkonstruovat a validovat rychlou LC–MS/MS metodu pro simultánní kvantifikaci osmi nitrosaminů (NDMA, NMBA, NDEA, NEIPA, NDIPA, NDPA, NMPA, NDBA) v API thiokolchikosidu. Metoda má splnit požadavky na nízké LOQ (0,5 ppb) a vysokou přesnost i opakovatelnost.

Použitá metodika a instrumentace

Pro separaci byla využita UHPLC Nexera XS s kolónou Shim-pack AQ C18 (100×4,6 mm, 3 μm) při teplotě 40 °C. Mobilní fáze tvořila 0,1 % kyselina formiová ve vodě (A) a v methanolu (B) v gradientním režimu. Detekce probíhala na Shimadzu LCMS-8045 (triple kvadrupól) s APCI ionizací, umožňující rychlé přepínání polarity a vysokou citlivost. Divertní ventil zajišťoval odklon hlavního API píku mimo MS detektor.

Instrumentace

• UHPLC Nexera XS (Shimadzu)
• Kolóna Shim-pack AQ C18, 100×4,6 mm, 3 μm
• LCMS-8045 triple kvadrupólový hmotnostní spektrometr (Shimadzu) s APCI

Hlavní výsledky a diskuse

Byly stanoveny kalibrační křivky v rozsahu 0,5–100 ppb pro všechny nitrosaminy s korelačními koeficienty R² > 0,995. LOQ bylo potvrzeno na 0,5 ppb s RSD ≤ 12,9 % a S/N > 6. Opakovatelnost (n=6) se pohybovala pod 15 % RSD. Recovery studie při 0,5, 1 a 3 ppb prokázaly 70–110 % návratnost, což potvrzuje přesnost a spolehlivost metody.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda nabízí jednoduchou přípravu vzorku bez složitých extrakcí, současnou analýzu osmi nitrosaminů a splnění přísných regulatorních požadavků. Je vhodná pro rutinní kontrolu kvality API i hotových farmaceutických produktů a zajišťuje vysokou průkaznost karcinogenních nečistot.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Rozšíření metody na další farmaceutická činidla a léčivé přípravky
• Zkrácení doby analýzy při zachování citlivosti
• Integrace do online monitorovacích systémů v průmyslových provozech
• Vývoj multiplexních protokolů pro screening širší škály nečistot

Závěr

Vyvinutá UHPLC–MS/MS metoda na platformě Shimadzu Nexera XS a LCMS-8045 prokázala vysokou citlivost, linearitu a reprodukovatelnost ve stanovení osmi nitrosaminů v thiokolchikosidu. Splňuje regulační limity a lze ji uplatnit v každodenní praxi QA/QC laboratoří.

Reference