Using the DPiMS-8060 Mass Spectrometer to Analyze Drugs in Plasma (1) - A Quantitative Analysis of Everolimu

Význam tématu

Stanovení koncentrace léčiv v plazmě je klíčové pro klinické monitorování, farmaceutický výzkum a kontrolu kvality.
Tradiční metody LC/MS vyžadují náročnou deproteinizační předúpravu a kolonu náchylnou ke kontaminaci.

Cíle a přehled studie

Účelem článku je představit rychlou a jednoduchou metodu kvantifikace everolimusu v komerční plazmě.
Využívá Shimadzu LCMS-8045 vybavený DPiMS-8060 probe electrospray ionizací (PESI).
Předúprava spočívá pouze v jednoduché deproteinizační proceduře a analýza probíhá přibližně za 10 minut na vzorek.

Použitá metodika a instrumentace

Přímá ionizace PESI odstraňuje potřebu chromatografické kolony, minimalizuje znečištění a matrix efekty.
Workflow přípravy vzorku:

• K 100 µl plazmy přidat 100 µl etanolu (LC/MS grade), promíchat 10 s.
• Centrifugovat 5 min při 10 000 g.
• Sběr supernatantu (10 µl na destičku).
• Přímá analýza na DPiMS-8060.

Použitá instrumentace:

• Shimadzu LCMS-8045 s DPiMS-8060 probe ESI.
• MS režimy: Q3 Scan (m/z 10–1200), Product Ion Scan (m/z 10–500).
• Typický průtok řešení: několik desítek pL na analýzu.

Hlavní výsledky a diskuse

U standardního everolimusu byly detekovány tři aduktu: [M+Na]+ (m/z 980,8), [M+K]+, [M+NH4]+. Pro kvantifikaci vybrán Na-adukt a fragment m/z 389,3 při CE –51,0.
Kalibrační křivka v rozsahu 3–50 ng/mL vykázala výbornou linearitu (R²=0,9972).
Variabilita (%RSD) do ~20 % (n=3) odpovídá požadavkům pro semi-kvantitativní i kvantitativní stanovení.
Celkový čas přípravy a analýzy je asi 10 minut na vzorek.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda nabízí rychlou a robustní analýzu bez opotřebení kolony a minimalizaci údržby zařízení.
Jednoduchá předúprava snižuje riziko kontaminace a matrix interferencí.
Vhodné pro vysokopropustné měření koncentrací farmak v klinických a výzkumných laboratořích.

Budoucí trendy a možnosti využití

Integrace PESI do plně automatizovaných workflow pro rychlý screening léčiv.
Rozšíření aplikací na další farmaka, metabolity a biologické matricie (moč, tkáně).
Vývoj kombinace s vysoce rychlými hmotnostními analyzátory pro zvýšení citlivosti a průchodnosti.

Závěr

DPiMS-8060 PESI systém umožňuje spolehlivé a rychlé kvantitativní stanovení everolimusu v plazmě s minimální předúpravou.
Krátký čas analýzy a vysoká reprodukovatelnost zvyšují efektivitu práce v analytických laboratořích.

Reference

• Shimadzu Corporation: Application Note DPiMS-8060 Probe Electrospray Ionization Mass Spectrometer, First Edition Jun. 2022.