EuroResidue: DEVELOPMENT OF A METHOD FOR THE DETERMINATION OF AMINOGLYCOSIDES IN FOODS USING LC-MS/MS WITH A NOVEL ZWITTERIONIC HILIC STATIONARY PHASE

Význam tématu

Detekce antibiotik ze skupiny aminoglykosidů v potravinách je klíčová pro zajištění bezpečnosti potravinářských výrobků a dodržování stanovených maximálních reziduálních limitů. Aminoglykosidy se široce využívají v živočišné výrobě jako veterinární léčiva a přidávají se do krmiv, což zvyšuje riziko nežádoucích reziduí v mléce, mase či medu. Spolehlivá analýza umožňuje kontrolu nadměrného užívání těchto látek a chrání spotřebitele před potenciálními zdravotními riziky.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo vyvinout a ověřit rychlou, citlivou a spolehlivou metodu pro stanovení sedmnácti aminoglykosidů v různých potravinových maticích (mléko, svalovina, játra, med) pomocí LC-MS/MS na nové zvířecí HILIC koloně Atlantis Premier BEH Z-HILIC. Studie zahrnovala optimalizaci extrakce, chromatografických podmínek i detekce a posouzení vlivu matice na výsledky.

Použitá metodika a instrumentace

• Extrahční pufr: 10 mM octan amonný, 0,4 mM EDTA, 0,5 % NaCl, 2 % trichloroctová kyselina (TCA).
• SPE čištění: Oasis HLB kazeta.
• Chromatografie: Atlantis Premier BEH Z-HILIC (2,1×150 mm, 2,5 µm); mobilní fáze A – 20 mM formiát amonný ve vodě (pH 3,0), B – 0,1 % kyselina formiová v acetonitrilu; gradientní eluce při 50 °C, průtok 0,7 mL/min, injekce 6 µL.
• Detekce: Waters Arc Premier LC systém s MaxPeak HPS povrchy; MS/MS na Xevo TQ-S micro s ESI v pozitivním módu; desolvační teplota 600 °C, zdroj 150 °C, kapilární napětí 1,5 kV.

Hlavní výsledky a diskuse

• Gradientní separace zajistila stabilní retence všech 17 aminoglykosidů (RSD retencí 0,01–0,91 %).
• Citlivost metody umožňuje detekci látek na úrovni maximálních reziduálních limitů.
• Maticové efekty se projevily jak potlačením, tak zvýšením signálu; doporučeno použití kalibrace ve stejné matici a interní standard (tobramycin).
• Při zkouškách na naspikované svalovině (250 µg/kg) byly zjištěny průměrné recoveries 101–134 % a opakovatelnost RSD 2,2–9,8 %.

Přínosy a praktické využití metody

Navržená metoda nevyžaduje iontově párovací činidla ani vysoké koncentrace pufrů, minimalizuje kontaminaci LC-MS systému a zefektivňuje analýzu díky nové zvířecí HILIC fázi. Metodu lze aplikovat pro rutinní kontrolu reziduí aminoglykosidů v potravinářských laboratořích a při auditních či regulačních testech.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se další rozvoj internal standardů pro korekci maticových efektů, automatizace přístrojového workflow a rozšíření metody na další biologické a potravinové matice. Dále lze integrovat multiplexní systémy pro vyšší propustnost a zdokonalení kvantitativních algoritmů.

Závěr

Vyvinutá LC-MS/MS metoda s Atlantis Premier BEH Z-HILIC fází nabízí spolehlivou, citlivou a rychlou analýzu aminoglykosidů v širokém spektru potravin. Po doplnění validačních kroků je vhodná pro rutinní monitorování a zajištění souladu s reziduálními limity.

Reference

• Adams S., Hird S., Yang J., Rainville P., Woyzek B. Development of a method for the determination of aminoglycosides in foods using LC-MS/MS with a novel zwitterionic HILIC stationary phase. Waters Corporation, 2022.