Extraction of THC and its Metabolites from Human Nail Samples Using ISOLUTE® SLE+ Prior to UPLC-MS/MS Analysis

Význam tématu

Nehty jako biologická matrice poskytují dlouhodobou stopu užití omamných látek a představují méně invazivní alternativu k krvi či moči. Detekce THC a jeho metabolitů v nehtech může napomoci forenznímu i klinickému vyšetřování.

Cíle a přehled studie

Cílem bylo vyvinout a validovat efektivní postup pro extrakci Δ9-THC, THC-COOH, THC-OH, THCAA, CBD a CBN z lidských nehtových vzorků s využitím mikropulverizace a podporované kapalné extrakce ISOLUTE SLE+.

Použitá metodika

• Mikropulverizace: sušené nehty rozdrceny v Biotage Lysera s ocelovými kuličkami.
• Extrakce: přidání kyseliny mravenčí v methanolu s interními standardy, rotace a centrifugace.
• Podporovaná kapalná extrakce: aplikace extraktu na ISOLUTE SLE+ sloupky nebo 96-well destičky, eluace MTBE.
• Odpaření: vysušení extraktů na TurboVap LV nebo SPE Dry-96.
• Rekonstrukce: rozpuštění v mobilní fázi pro UPLC-MS/MS.

Použitá instrumentace

• Biotage Lysera pro mikropulverizaci vzorků
• ISOLUTE SLE+ 400 µL sloupky (p/n 820-0055-B) a 96-well destičky (p/n 820-0400-P01)
• TurboVap LV / SPE Dry-96 pro odpařování extraktů
• Shimadzu Nexera X2 UHPLC se kolonkou Restek Pinnacle DB Biphenyl
• Shimadzu 8060 Triple Quadrupole MS s ESI rozhraním

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda dosahuje čistých extraktů s průměrnými obnovami >75 % pro sloupky (a >70 % pro destičky) a RSD <10 % pro všechny analyty. LLOQ se pohybují pod 10 pg/mg nehtu, pro THCAA až 0,02 pg/mg. Kalibrační křivky vykazují vynikající linearitu (r2 >0,999).

Přínosy a praktické využití metody

• Rychlá a jednoduchá příprava vzorků bez emulzí
• Vysoká citlivost a reprodukovatelnost analýzy
• Možnost sériového zpracování v 96-well formátu
• Využití v forenzní, klinické a QA/QC laboratoři

Budoucí trendy a možnosti využití

• Adaptace na další semipevné matrice (vlasy, kůže)
• Automatizace procesů pro větší propustnost
• Rozšíření spektra analyzovaných látek
• Integrace s novými MS technikami pro vyšší citlivost

Závěr

Prezentovaná metoda kombinuje účinnou mikropulverizaci a podporovanou kapalnou extrakci, což vede k rychlému, citlivému a reprodukovatelnému stanovení THC a jeho metabolitů v lidských nehtech.

Reference

• Biotage Application Note AN929, 2020