Extraction of Propofol from Whole Blood Using ISOLUTE® SLE+ Prior to GC/MS Analysis

Význam tématu

Anaestetikum propofol se běžně používá ve formě injekcí k indukci a udržení anestezie. Pro přesné stanovení jeho koncentrace v krvi je nutné spolehlivé oddělení od matricových interferencí, což vede k vyšší citlivosti a přesnosti analýz.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem bylo vyvinout a optimalizovat protokol podporované kapalné extrakce (SLE+) pomocí ISOLUTE SLE+ sloupců v kapacitách 400 µL a 1 mL pro následnou GC/MS analýzu propofolu v plné krvi.

Použitá metodika a instrumentace

• Příprava vzorků: Přidání Propofol-d17 jako vnitřního standardu, ředění krve 1:1 vodou.
• Extrakce SLE+:
  • 400 µL sloupce (820-0055-B): 300 µL vzorku, 2× 1 mL MTBE, eluace do TBAH/methanol.
  • 1 mL sloupce (820-0140-C): 800 µL vzorku, 2× 2,5 mL MTBE.
• Sušení eluátů: vzduch/dusík (20–40 L/min) nebo TurboVap (1,0 bar) po dobu 40 min.
• Rekonstrukce: 100 µL heptanu, vortex 20 s, transfer do skleněné vialky.
• GC/MS: Agilent 7890A/5975C; kolona Phenomenex Zebron ZB-Semivolatiles; He 1,2 mL/min; teplotní program 60–330 °C; režim SIM (Propofol 178/163, Propofol-d17 195/177).

Hlavní výsledky a diskuse

• Výtěžnost extrakce 95–104 % s RSD < 6 %.
• Kalibrace 2,5–1000 ng/mL, r2 = 0,999.
• Čistota extraktů: nízká koextrakce fosfolipidů v porovnání s precipitovanou plazmou.

Přínosy a praktické využití metody

• Rychlá alternativa LLE bez emulzí.
• Snížení spotřeby rozpouštědel a času.
• Vysoká reprodukovatelnost vhodná pro bioanalýzy a klinické studie.
• Kompatibilní i s LC-MS/MS díky čistým extraktům.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Rozšíření na další analyty a panel drog.
• Automatizace a vysokopropustnost přípravy vzorků.
• Miniaturizace a kapilární GC-MS systémy.
• Integrace on-line chromatografie a hromadného screeningu.

Závěr

Protokol ISOLUTE SLE+ poskytuje vysokou výtěžnost, opakovatelnost a čistotu extraktů propofolu z plné krve. Optimalizované formáty 400 µL a 1 mL jsou vhodné pro GC/MS a rozšiřitelné pro LC-MS/MS a automatizované workflow.

Reference

• Biotage Application Note AN816, 2014.