Extraction of Designer Stimulants from Urine Using ISOLUTE® SLE+ prior to GC/MS Analysis

Význam tématu

Extrahování a analýza tzv. designer stimulantů z biologických vzorků je klíčová pro forenzní i klinickou toxikologii. Moderní sloučeniny jako 5-APB, 6-APB, pMMA či 2C-B se často vyskytují v nelegálních přípravcích a vyžadují citlivé a spolehlivé analytické metody. Podpora správné identifikace a kvantifikace těchto látek přispívá k bezpečnosti a ochraně zdraví.

Cíle a přehled studie

Cílem této studie bylo navrhnout a optimalizovat postup extrakce vybraných designérských stimulantů z moči pomocí podporované extrakce kapalina-kapalina (SLE+) před jejich analýzou GC/MS. Protokol je zaměřen na 1 mL objem vzorku a je aplikovatelný i na příbuzné deriváty, například substituované katinony.

Použitá metodika a instrumentace

Vzorky moče byly nejprve obohaceny o internal standard amphetamin-d5 a naředěny 1% roztokem hydroxidu amonného. Extrakce probíhala na ISOLUTE SLE+ 1 mL sloupcích, kdy vzorek vsákl po 5 minutách. Eluce byla provedena ve dvou dávkách MTBE (2 × 2 mL) do roztoků kyseliny chlorovodíkové v methanolu. Po odpaření v proudu dusíku či vzduchu následovala derivatizace pentafluoropropionanhydridem a rozpuštění v ethylacetátu. GC/MS analýza využila Agilent 7890A s kolónou Zebron ZB-Semivolatiles a Agilent 5975C v SIM módu.

Použitá instrumentace

• ISOLUTE SLE+ 1 mL kolony (Biotage 820-0140-C)
• Agilent 7890A GC s QuickSwap a Phenomenex Zebron ZB-Semivolatiles (30 m × 0,25 mm × 0,25 μm)
• Agilent 5975C MSD v SIM módu
• SPE Dry (Biotage SD-9600) a TurboVap (Biotage C103198/C103199) pro odpařování vzorků

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda dosáhla vysokých relací recoveries (105–109 %) s RSD pod 10 % pro všechny analyty. Linearita v rozsahu 10–500 ng/mL vykazovala r2 hodnoty mezi 0,992 a 0,996. Dolní mez kvantifikace (LLOQ) se pohybovala mezi 10 a 20 ng/mL v závislosti na konkrétním analytu.

Přínosy a praktické využití metody

• Rychlejší a robustní alternativa k tradiční LLE bez vzniku emulzí
• Vysoká selektivita a citlivost GC/MS analýzy ve vybraném iontovém módu
• Minimální objem vzorku (1 mL) a nízká spotřeba organických rozpouštědel
• Možnost aplikace i na příbuzné látky, jako jsou substituované katinony

Budoucí trendy a možnosti využití

Další rozvoj může zahrnovat optimalizaci pre-úpravy vzorku, použití alternativních elučních rozpouštědel (např. DCM), automatizaci extrakčních kroků a rozšíření metodiky na širší škálu psychoaktivních látek.

Závěr

Optimalizovaný SLE+ protokol pro extrakci designérských stimulantů z moči poskytuje spolehlivou a efektivní přípravu vzorku pro GC/MS analýzu s vysokou návratností, nízkými detekčními limity a širokou přizpůsobitelností.

Reference

• Biotage Application Note AN808 (2013)
• Biotage Application Note AN776 (2012)