Analysis of CefemAntibiotics

Význam tématu

Simultánní stanovení cefalosporinových antibiotik je klíčové pro farmaceutický výzkum a kontrolu kvality. Díky vysoké polaritě a strukturálním podobnostem těchto látek je nutné použít vysoce selektivní a citlivou metodu, která umožní přesnou separaci i detekci v komplexních vzorcích.

Cíle a přehled studie

Cílem bylo vyvinout a validovat reverzně-fázovou chromatografickou metodu schopnou separovat a kvantifikovat 13 cefalosporinů v jednom analytickém běhu. Studie porovnává výkon dvou kolonních formátů Shim-pack VP-ODS a Shim-pack XR-ODSⅡ na systému Nexera-i.

Použitá metodika a instrumentace

• Systém: Shimadzu Nexera-i s detektorem LC-2040C 3D (UV detekce při 260 nm, vysokorychlostní bunka).
• Kolony:
  • Shim-pack VP-ODS (250 mm × 4,6 mm I.D., 5 µm)
  • Shim-pack XR-ODSⅡ (150 mm × 3,0 mm I.D., 2,2 µm)
• Mobilní fáze:
  • A: 0,1 % kyselina mravenčí ve vodě
  • B: acetonitril
• Gradientní program:
  • VP-ODS: B z 15 % → 55 % (0–35 min), návrat na 15 % (35,01–50 min)
  • XR-ODSⅡ: B z 15 % → 55 % (0–6,95 min), návrat na 15 % (6,96–10 min)
• Tok: 0,7 mL/min (VP-ODS), 0,9 mL/min (XR-ODSⅡ)
• Teplota kolony: 40 °C
• Objem injekce: 5 µL (VP-ODS), 2 µL (XR-ODSⅡ)

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda umožnila baseline separaci všech monitorovaných cefalosporinů s dobrou reprodukovatelností retenčních časů a dosažitelnou citlivostí pro koncentrace 50 mg/L. Kratší formát XR-ODSⅡ dosáhl rychlejší analýzy (do 10 min), zatímco VP-ODS zajistil vyšší rozlišení při delším běhu (do 50 min).

Přínosy a praktické využití metody

• Rychlá a spolehlivá analýza 13 β-laktamových antibiotik v jedné injekci.
• Flexibilita volby kolony podle požadavků na čas analýzy versus rozlišení.
• Vhodné pro kontrolu kvality farmaceutických přípravků a reziduálních testů.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se rozšíření metodiky pro ultra-rychlé LC-MS/MS analýzy, integraci s automatizovanými systémovými platformami a aplikace v environmentálních a biologických matricích. Vývoj nových stacionárních fází s vyšší účinností by mohl dále zkrátit dobu analýzy.

Závěr

Představená reverzně-fázová LC metoda s použitím Shim-pack VP-ODS a XR-ODSⅡ kolony na systému Nexera-i prokázala vysokou účinnost, přesnost a flexibilitu při stanovení cefalosporinů. Výběr formátu kolony umožňuje optimalizovat poměr mezi dobou analýzy a rozlišením. Metoda je vhodná pro rutinní farmaceutickou kontrolu kvality.

Reference

• Shimadzu Corporation. Application News L475 (JP, ENG). ERAS-1000-0175A, Dec. 2021.
• CoreFocus, Shim-pack, Nexera jsou ochranné známky Shimadzu Corporation.