Příprava vzorků, HPLC, LC/MS
ZaměřeníKlinická analýza
VýrobceThermo Fisher Scientific
Význam tématu
Analýza sušených vzorků (dried spot analysis) představuje efektivní a nákladově úspornou metodu pro zpracování biologických kapalin v klinickém výzkumu. Díky minimalizaci laboratorních zásahů a možnosti dlouhodobé skladovatelnosti vzorků se jedná o důležitý nástroj pro vysokopropustné LC-MS/MS aplikace, zajišťující přesnou identifikaci a kvantifikaci analytů v různých matricích.
Cíle a přehled studie
Cílem bylo představit plně automatizovaný systém Thermo Scientific Transcend DSX-1 a demonstrovat jeho využití pro kvantifikaci tramadolu a jeho metabolitů v sušených vzorcích krve, séra, moči a slin. Studie se zaměřila na validaci linie kalibrace, opakovatelnost a robustnost metody ve všech uvedených matricích.
Použitá metodika
Workflow začíná odběrem vzorku na speciální kartu s možností zachování kontinuity vzorku a autentizace pomocí snímání kódu a obrazu karty. Inovativní technologie Flow-Through Desorption (FTD™) umožňuje přímou eluci analytů ze sušeného místa kartičky do UHPLC systému, kde probíhá on-line čištění a obohacení pomocí TurboFlow technologie. Postup zahrnuje:
- Automatickou sekvenci desorpce a oplachu sušeného vzorku pomocí vysokotlakého dávkovače (HPD™).
- On-line průtokové čištění a retenci malých molekul v turbulentním režimu.
- Přepínání ventilů a gradientní eluci na analytickém sloupci pro rozdělení komponent.
Použitá instrumentace
- Thermo Scientific Transcend DSX-1 UHPLC systém se sušeným modulem (DSM), HPD a AISA™.
- TurboFlow™ čisticí kolona pro on-line zpracování komplexních matric.
- Intelligent Vision Camera™ pro přesné snímání pozice, velikosti a tvaru skvrny a čárových kódů.
- Thermo Scientific TSQ Altis™ triple quadrupole hmotnostní spektrometr.
- Řídicí a vyhodnocovací software Aria™ MX a TraceFinder™.
Hlavní výsledky a diskuse
Kvantifikace tramadolu a jeho O-desmethyl a N-desmethyl metabolitů prokázala lineární rozsah kalibrace 5–400 ng/mL (R2 > 0,99) s relativními odchylkami i variačními koeficienty pod 20 % ve všech matricích. Opakovatelnost interního standardu přes značení více než 40 injekcí ukázala stabilní peak oblasti se zanedbatelnými odchylkami mezi vzorky.
Přínosy a praktické využití metody
Automatizovaný přístup významně snižuje čas přípravy od více hodin na méně než 10 minut na 96 vzorků. Metoda zajišťuje plnou stopovatelnost, minimalizaci rizika kontaminace a robustní výkon při analýze komplexních biologických matric. Díky kompatibilitě s MAS spektrometry lze snadno integrovat do existujících laboratorních linek pro QA/QC, toxikologii i dopingové kontroly.
Budoucí trendy a možnosti využití
Další rozvoj směřuje k rozšíření portfolia analyzovaných látek, adaptaci na ultra-vysokopropustné lipidové a proteomické aplikace a integraci s pokročilými algoritmy pro automatizovanou interpretaci dat. Potenciál vidíme rovněž v telemedicíně a personalizované medicíně, kde malé objemy suchých vzorků přispějí ke vzdálenému monitoringu pacientů.
Závěr
Transcend DSX-1 poskytuje plně automatizované, robustní a efektivní řešení pro sušené vzorky, které přináší významné úspory času a zdrojů při zachování vysoké kvality dat. Metoda splňuje nároky klinického výzkumu i regulovaných oblastí a otevírá cestu k dalším inovacím v analytické chemii.
Obsah byl automaticky vytvořen z originálního PDF dokumentu pomocí AI a může obsahovat nepřesnosti.