Method transfer of a USP-derived acetaminophen assay from an UltiMate 3000 SD system to a Vanquish Flex UHPLC system

Význam tématu

Analytický přenos metod HPLC/UHPLC je klíčový pro farmaceutický výzkum a regulovanou kontrolu kvality. Při přechodu mezi platformami musí být zachována reprodukovatelnost a validita výsledků bez rozsáhlé revalidace.

Cíle a přehled studie

Cílem bylo demonstrovat přímý přenos USP-odvozené metody stanovení acetaminofenu a jeho nečistot z UltiMate 3000 SD HPLC na Vanquish Flex UHPLC. Studie zhodnotila vliv gradient delay volume a teplotních režimů na retenci a kvalitativní parametry chromatogramu.

Použitá metodika a instrumentace

Použité chromatografické podmínky zahrnovaly kolonu Hypersil GOLD C8 (4,6 × 100 mm, 3 µm), mobilní fáze A: fosfátový pufr, B: methanol, gradientní eluci, průtok 1 mL/min, teplota kolony 35 °C a detekci při 230 nm. Jako přístroje byly použity:

• UltiMate 3000 SD Quaternary (pumpa LPG-3400SD, autosampler WPS-3000TSL, TCC-3000SD, DAD-3000)
• Vanquish Flex Quaternary (pumpa F, split sampler FT, Column Comp H, DAD FG)

Hlavní výsledky a diskuse

Přizpůsobením idle volume autosampleru na 53 µL (bez předehřevu) a 79 µL (s předehřevem) se dosáhlo rozdílů retencí <0,3 % vůči původní metodě. Metoda splňovala USP kritéria (rozlišení >3,2; asymetrie 0,99–1,1; RSD výšek <0,5 %). Signal-to-noise se při transferu zlepšil.

Přínosy a praktické využití metody

Přenos lze provést bez změny chromatografických podmínek, což šetří čas a náklady na revalidaci. Regulovaná prostředí tak získávají flexibilitu při upgradech přístrojových platforem.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další rozvoj zahrnuje automatizované nástroje pro přenos metod, adaptivní řízení gradient delay volume a širší využití UHPLC k dosažení vyšší propustnosti a citlivosti.

Závěr

Studie prokázala, že díky variabilnímu idle volume a volitelným režimům předehřevu lze snadno přenést HPLC metodu mezi generacemi systémů při zachování kvality analýzy.

Reference

1. Swartz ME, Krull I. Analytical Method Transfer. LCGC North America. 2006;24(11):1204–1214.
2. Ermer J, Limberger M, Lis K, Wätzig H. The transfer of analytical procedures. J Pharm Biomed Anal. 2013;85:262–276.
3. Paul C, Grübner M, Steiner F. Instrument parameter guide for UHPLC method transfer. Thermo Fisher Scientific White Paper 72711. 2018.
4. United States Pharmacopeia. USP40–NF35 S2. Acetaminophen method. The United States Pharmacopeial Convention. 2017.
5. Grübner M, Paul C, Steiner F. Transfer of a USP derived Acetaminophen assay from Agilent 1260 to UltiMate 3000 and Vanquish Flex. Thermo Fisher Scientific Application Note 72717. 2018.
6. United States Pharmacopeia. USP40–NF35 S2. General chapter 621 Chromatography. The United States Pharmacopeial Convention. 2017.