Enhanced Recovery of Released Glycans Using QuanRecovery Sample Vials with MaxPeak High Performance Surfaces (HPS) Technology

Význam tématu

- Glykanová analýza je klíčová pro hodnocení kvality bioterapeutik.
- Nonspecifická adsorpce uvolněných glykanů vede k nepřesným, nekonzistentním datům.
- Povrch vzorkových lahviček je často podceňován, i přesto významně ovlivňuje stabilitu a návratnost glykanů.

Cíle a přehled studie / článku

Text předkládá řešení pro zvýšení návratnosti a stability uvolněných glykanů v HILIC-FLR/MS analýze pomocí speciálních vzorkových lahviček QuanRecovery s technologií MaxPeak HPS.

Použitá metodika a instrumentace

• Uvolnění a značení glykanů z biokonjugátů.
• Chromatografická separace metodou HILIC na ACQUITY Premier BEH Amide kolonu.
• Detekce kombinovaná fluorescenčním a hmotnostním spektrometrem (BioAccord LC-MS System).
• Porovnání běžných polypropylénových lahviček s QuanRecovery Sample Vials.

Hlavní výsledky a diskuse

• Značný nárůst a stabilita fluorescence (FLR) u sialylovaných glykanů (FA2BG2S2) – téměř dvojnásobná odezva oproti polypropylénu.
• Vyšší konzistence hmotnostně spektrometrické odezvy u nízce zastoupeného mannóz-6-fosfátu (M6P) přes 15 injekcí.
• Potvrzení schopnosti MaxPeak HPS redukovat nonspecifickou adsorpci u nabitých glykanů.
• Zvýšení reprodukovatelnosti a kvality dat v glykanovém profilu.

Přínosy a praktické využití metody

- Zlepšení přesnosti a reprodukovatelnosti HILIC-FLR/MS metod při analýze glykanů.
- Jednoduchá integrace do stávajících workflow bez změn chromatografických podmínek.
- Vhodné pro kvalitativní i kvantitativní monitoring glykanových vzorců v biotechnologickém výzkumu a výrobě.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Další optimalizace povrchových úprav lahviček pro široký rozsah biomolekul.
• Integrace s automatizovanými platformami pro vysokoprůchodovou glykosanalýzu.
• Vývoj komplementárních povrchových technologií ke zvýšení stability proteinů a peptidů.
• Rozšíření aplikace na analýzu komplexních glykoproteinů a glykomických studií.

Závěr

QuanRecovery Sample Vials s MaxPeak HPS technologií významně redukují ztráty uvolněných glykanů způsobené povrchovou adsorpcí, což vede k vyšší konzistenci a přesnosti HILIC-FLR/MS analýz. Implementace těchto speciálních lahviček společně s ACQUITY Premier řešením přináší robustní platformu pro vývoj a kontrolu kvality bioterapeutik.

Reference

1. Liu X. a Lauber M.; MaxPeak High Performance Surfaces Technology Improves HILIC Profiling of Released N-Glycans. Waters Application Note, 720007263EN, 2021.