LC/MS, LC/MS/MS, LC/QQQ
ZaměřeníFarmaceutická analýza
VýrobceShimadzu
Význam tématu
Zjištění N-nitrosodimethylaminu (NDMA) v ranitidinu vzbudilo celosvětovou pozornost vzhledem k jeho karcinogennímu působení a častým stažením léčiv z trhu.
Citlivé a spolehlivé analytické metody pro detekci stopových množství NDMA jsou klíčové pro zajištění bezpečnosti farmaceutických produktů a ochranu pacientů před potencálně nebezpečnými kontaminanty.
Cíle a přehled studie / článku
Cílem studie bylo vyvinout a validovat vysoce citlivou metodiku založenou na LC-MS/MS se stacionární fází APCI pro kvantitativní stanovení NDMA v API a hotových formách ranitidinu.
Metoda vychází z doporučení US FDA z října 2019, s modifikacemi v přípravě vzorků a v analytických podmínkách pro zlepšení robustnosti a reprodukovatelnosti.
Použitá metodika a instrumentace
Příprava vzorků:
- Pevné formy (tablety, API): 20 mg ranitidinu extrahovaných v MeOH/H₂O (5:95) s 0,1 % kyselinou mravenčí, třepání 30 min, centrifugace, filtrace 0,22 μm.
- Kapalinové formy (sirup, injekční roztok): přímé naředění do diluentu MeOH/H₂O (5:95) s 0,1 % FA.
- LC-MS/MS systém Shimadzu LCMS-8060 s rozhraním APCI (350 °C).
- Kolona Shim-pack Scepter C18-120 (3,0×150 mm, 1,9 μm), teplota 45 °C.
- Mobilní fáze: A – voda + 0,1 % kyselina mravenčí; B – methanol + 0,1 % kyselina mravenčí; gradient 4–95 % B dle stanoveného protokolu.
- Detekce MRM: kvantifikátor 75 → 43, potvrzení 75 → 58, injekční objem 30 μL.
Hlavní výsledky a diskuse
Metoda byla kalibrována v rozmezí 1–200 ng/mL NDMA, s koeficientem determinace R² > 0,998 a LOD/LOQ umožňující detekci nižších jednotek pg/mL.
Testování system suitability potvrdilo RSD < 10 % pro 1 ng/mL standard (n=6) v různých dnech, splňující požadavky FDA.
Analýza skutečných vzorků ukázala, že všechny testované formy ranitidinu obsahovaly NDMA v rozmezí 0,74 až 11,09 ppm, což výrazně překračuje doporučenou mez 0,32 ppm.
Přínosy a praktické využití metody
- Vysoká citlivost a selektivita umožňují spolehlivou detekci stopových hladin NDMA.
- Robustní výkon včetně nízké variability mezi jednotlivými běhy a dny.
- Univerzální aplikace na různé farmaceutické formy ranitidinu (API, tablety, sirup, injekce).
Budoucí trendy a možnosti využití
- Rozšíření metodiky na další N-nitrosaminy v různých léčivých substancích.
- Integrace s vysokorozlišovací hmotnostní spektrometrií pro potvrzení struktury kontaminantů.
- Automatizace přípravy vzorků a multimodální screening karcinogenů v environmentálních či biologických matricích.
Závěr
Navržená LC-MS/MS metoda na platformě Shimadzu LCMS-8060 s APCI nabízí účinné a validované řešení pro kvantitativní stanovení NDMA v ranitidinu, zajišťující splnění regulačních požadavků a ochranu spotřebitele před karcinogenními nečistotami.
Reference
- US FDA. Statement alerting patients and health care professionals of NDMA found in samples of ranitidine. 13 Sep 2019.
- US FDA. LC-MS/MS Method for the Determination of NDMA impurity in Ranitidine Drug Substance or Solid Dosage Drug Product. 10 Oct 2019.
Obsah byl automaticky vytvořen z originálního PDF dokumentu pomocí AI a může obsahovat nepřesnosti.