Detection of synthetic forms of endogenous anabolic androgenic steroids by GC-C-IRMS

Význam tématu

Detekce syntetických forem endogenních anabolicko-androgenních steroidů je klíčová pro zajištění férovosti ve sportu podle požadavků Světové antidopingové agentury (WADA). Metoda specifické analýzy stabilních izotopů uhlíku (GC-C-IRMS) umožňuje rozlišit přírodní a syntetický testosteron na základě odlišných poměrů 13C/12C, čímž se stává nezastupitelnou součástí protidopingových vyšetření.

Cíle a přehled studie / článku

Úkolem studie je představit kompletní řešení AnthrovisION pro GC-C-IRMS ve shodě s WADA Tech. Doc. TD2016IRMS. Study popisuje analytickou přístupovou cestu od přípravy močových vzorků přes chromatografickou separaci až po přesnou detekci izotopických poměrů za účelem prokázání užití syntetického testosteronu.

Použitá metodika a instrumentace

Ultracennou součástí workflow je extrakce, hydrolýza a očista močových konjugátů (T, E, 5α-adiol, 5β-adiol, A, Et) spolu s endogenními referenčními sloučeninami (Pgdiol, 16-enol) pomocí SPE nebo HPLC. Po případné derivatizaci následuje analýza GC-C-IRMS.

• Gas chromatograph: Agilent 7890B s kapilární kolonkou
• Furnace Interface: GC-5 s mikroreaktorem pro kvantitativní spalování na CO2
• Isotope Ratio Mass Spectrometer: Isoprime visION s automatizovanou validací a liniaritou
• Software: IONOS pro kompletní zpracování dat, patentované mapování píků a výpočet kombinací ERC/TC

Hlavní výsledky a diskuse

Dlouhodobá přesnost měření u kontrolních vzorků dosahuje standardních odchylek 0,2–0,5 ‰. Linearita signálu byla potvrzena v rozsahu 0,1–17 nA s doporučenou hranicí LOiQ 0,5 nA (cca 4 ng analyzované látky). Výsledné chromatogramy vykazují ostré, dobře oddělené píků pro všechny cílové a referenční steroidy.

Přínosy a praktické využití metody

AnthrovisION řešení kombinuje špičkovou chromatografii Agilent s robustním spalovacím modulem GC-5 a pokročilým IRMS visION. Komplexní software IONOS zajišťuje stoprocentní auditovatelnost a automatizaci analýzy. Celkově přístrojový řetězec zvyšuje citlivost, zkracuje časy analýzy a minimalizuje riziko chyb.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekávané směry dalšího vývoje zahrnují miniaturizaci GC-C-IRMS modulů, rozšíření na další dopingové látky, pokročilou chemometrickou analýzu dat a integraci umělé inteligence pro detekci neznámých anabolik.

Závěr

Kompletní řešení AnthrovisION pro GC-C-IRMS splňuje nejpřísnější požadavky WADA. Díky vysoké přesnosti, automatizovanému zpracování a dlouhodobé stabilitě představuje ideální nástroj pro laboratoře bojující proti užívání zakázaných steroidů.

Reference

• Ouellet A., LeBerre N., Ayotte C. A simplified and accurate method for the analysis of urinary metabolites of testosterone-related steroids using gas chromatography/combustion/isotope ratio mass spectrometry. Rapid Communications in Mass Spectrometry, 27, 1739–1750, 2013.
• WADA Technical Document TD2016IRMS, Detection of synthetic forms of endogenous anabolic androgenic steroids by GC/C/IRMS.