Determination of cannabinoids (THC) in urine samples with GC-MS

Význam tématu

V oblasti toxikologické a forenzní analýzy je přesné stanovení kanabinoidů v moči klíčové pro monitorování užití konopí, dodržování léčebných protokolů, testování na pracovišti a dopravní kontrolu pod vlivem drog. Rychlé a citlivé metody umožňují vyhodnocení metabolitů THC a zajišťují spolehlivé výsledky při nízkých koncentracích.

Cíle a přehled studie

Studie popisuje komplexní postup pro kvantifikaci hlavního psychoaktivního činidla delta-9-THC a jeho metabolitů (THC-OH, THC-COOH) v moči pomocí plynové chromatografie s hmotnostní detekcí (GC-MS). Cílem je ověřit linearitu, reprodukovatelnost a uživatelskou jednoduchost přípravy vzorku.

Použitá metodika

• Hydrolýza: inkubace vzorku moči s β-glukuronidázou a pufrem při 37 °C přes noc.
• Alkální rozpuštění: přídavek NaOH a extrakce s směsí ethylacetátu a hexanu.
• Dvojí extrakce: organická fáze spojena a koncentrována pod dusíkem.
• Derivatisace: přidání MSTFA a ethylacetátu, inkubace při 80 °C po dobu 30 min.

Použitá instrumentace

• Chromatograf: Shimadzu GCMS-QP2010plus s režimem SIM.
• Kolona: Optima® 5 HT, 30 m × 0,25 mm ID, 0,25 µm.
• Nosič plyn: helium, 1,31 mL/min.
• Derivatiser: MSTFA (N-Methyl-N-trimethylsilyl-trifluoracetamid).
• Injektor: splitless při 250 °C, injekční objem 1 µL.

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda prokázala vynikající linearitu v rozsahu 25–250 ng/mL s koeficienty determinace R2 > 0,996. Standardní a močené kalibrační křivky vykázaly shodné odezvy. Detekční limity se pohybují v nízkých desítkách ng/mL, což stačí pro většinu forenzních a klinických aplikací.

Přínosy a praktické využití metody

• Jednoduchá a rychlá příprava vzorku s minimální potřebou materiálu.
• Vysoká citlivost a selektivita díky SIM režimu GC-MS.
• Možnost paralelního vyšetření velkého počtu vzorků.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další zlepšení lze dosáhnout použitím pevné fáze extrakce (SPE) ke zvýšení čistoty extraktů nebo nasazením hmotnostních detektorů s vyšší citlivostí (HRMS). Integrace automatizovaných přípravných modulů přispěje k vyšší reprodukovatelnosti a throughputu.

Závěr

Popisovaná GC-MS metoda poskytuje spolehlivý a efektivní postup pro stanovení kanabinoidů v moči. Díky jednoduché přípravě vzorku, dobré linearitě a citlivosti představuje vhodný nástroj pro forenzní, klinickou i pracovní toxikologii.

Reference

1. Constituents of Cannabis sativa. Georg Thieme Verlag Stuttgart · New York.
2. F. Grotenhermen, Journal of Cannabis Therapeutics, Vol. 3(1) 2003, Clinical Pharmacokinetics of Cannabinoids.
3. T. Nadulski et al., Journal of Analytical Toxicology, 29(8), 2005, Pages 782–789.