Automated Switching Between 1D-LC and Comprehensive 2D-LC Analysis – The Agilent 1290 Infinity 2D-LC Solution

Význam tématu

Komplexní dvoudimenzionální kapalinová chromatografie (LC×LC) rozšiřuje špičkovou kapacitu 1D-LC a umožňuje detailní separaci složitých směsí. Flexibilní přepínání mezi 1D-LC a LC×LC zkracuje čas přípravy metody a eliminuje nutnost fyzických úprav přístroje.

Cíle a přehled studie

Cílem bylo představit modulární řešení Agilent 1290 Infinity 2D-LC se speciálním 2pozicovým/6portovým ventilem, které umožňuje softwarové přepnutí mezi 1D-LC a komplexní LC×LC analýzou. Výkon byl demonstrován na stanovení fenolických látek v panenském olivovém oleji.

Použitá instrumentace

• Agilent 1290 Infinity Binary Pumpy (G4220A)
• Autosampler s termostatem (G4226A, G1330B)
• Termostatovaná kolonna (G1316C) s 2poz/6port ventilem (p/n 5067-4117)
• Ventilový pohon (G1170A) pro 2poz/4port duo ventil
• Diode Array Detektor (G4212A)
• Software Agilent OpenLAB CDS a GC Image LC×LC Edition

Metodika

1D-LC: Fenyl-Hexyl kolonna (2,1×150 mm, 1,8 µm), mobilní fáze voda/methanol s 0,1 % kyselinou mravenčí, gradient 5→95 % B za 15 min, 0,2 mL/min, DAD při 260 nm.
LC×LC: První dimenze stejná kolonna při 0,05 mL/min, druhá C18 (3,0×50 mm, 1,8 µm) při 3 mL/min s cyklickým modulačním cyklem 30 s, smyčkové modulační ventily (2×60 µL), teploty 25 °C (1D) a 60 °C (2D).

Hlavní výsledky a diskuse

Srovnávací 1D-LC analýzy vzorku s a bez 2poz/6port ventilu prokázaly identickou chromatografickou křivku bez ztráty rozlišení. V LC×LC režimu nebyl ventilem ovlivněn průběh separace; drobné posuny retencí byly přičteny fázím modulačního cyklu.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda poskytuje jediné LC uspořádání pro rutinní 1D-LC a vysoce výkonnou LC×LC, šetří čas na přestavbu a kalibraci, zvyšuje produktivitu laboratoří a rozšiřuje analytické možnosti v potravinářské, farmaceutické i environmentální analýze.

Budoucí trendy a možnosti využití

Integrace s hmotnostní spektrometrií zlepší selektivitu, adaptivní modulační režimy mohou dále zvětšit separační prostor, a rozšíření multidimenzionální chromatografie o další dimenze (LC×LC×LC) nabídne nový rozměr kvality dat.

Závěr

Implementace 2poz/6port ventilu do Agilent 1290 Infinity 2D-LC umožňuje rychlé softwarové přepínání mezi 1D-LC a LC×LC bez kompromisů v kvalitě separace. Tento přístup zvyšuje flexibilitu a efektivitu provozu kapalinové chromatografie.

Reference

• Dugo L. et al., Comprehensive multidimensional liquid chromatography: theory and applications, J. Chromatogr. A, 1184, 353–368 (2008).
• Giddings J.C., Two-dimensional separations: concept and promise, Anal. Chem., 56, 1258A–1264A (1984).
• Duck P. et al., A simple method for determination of peak distribution in comprehensive LC×LC, J. Chromatogr. A, 1246, 69–75 (2012).
• International Olive Council, COI/T.20/DOC.29: Determination of biophenols in olive oils by HPLC, 2009.
• Naegele E., Performance evaluation of the Agilent 1290 Infinity 2D-LC Solution for comprehensive two-dimensional liquid chromatography, Agilent Techn. Overview, 5991-0138EN (2012).
• Krieger S., Schneider S., Quality Analysis of Extra Virgin Olive Oils – Part 7, Agilent Techn. Application Note, 5991-4515EN (2014).