Therapeutic drug monitoring of Antiepileptic drugs in serum: a fully automated approach

Význam tématu

Epilepsie patří mezi nejrozšířenější neurologické poruchy a efektivní farmakoterapie vyžaduje přesné monitorování hladin antiepileptik v séru. Variabilita farmakokinetiky těchto látek mezi pacienty i v jednotlivých dávkách znamená, že rutinní analytické metody musí být vysoce přesné, citlivé a dostatečně výkonné pro každodenní použití v klinických i výzkumných laboratořích.

Cíle a přehled studie / článku

Tento příspěvek popisuje vývoj a validaci plně automatizovaného postupu pro kvantifikaci 26 antiepileptik pomocí LC–MS/MS. Cílem je eliminovat manuální krok srážení proteinů a extrakce vzorku, zkrátit čas analýzy, zlepšit opakovatelnost a snížit riziko lidské chyby.

Použitá metodika a instrumentace

Pro přípravu vzorků byl využit automatický systém CLAM-2000 (Shimadzu) propojený s kapalinovou chromatografií Nexera X2 a trojnásobným kvadrupólovým detektorem LCMS-8060. Jako kalibrátory a interní standardy sloužil kit ClinMass® TDM (Recipe Chemicals + Instruments). Postup zahrnoval odebírání sérových vzorků, proteinovou srážku, filtraci a automatický přenos připraveného eluátu do chromatografu.

Hlavní výsledky a diskuse

• Automatizace přípravy vzorku umožnila kontinuální provoz a časovou úsporu – jeden výsledek každých 6 minut.
• Porovnání s manuální přípravou (Passing–Bablokova analýza) prokázalo vynikající korelaci mezi oběma metodami.
• Linearita metod pro všech 26 analyzovaných antiepileptik vykázala koeficienty R2 nad 0,97 a přesnost 85–115 %.
• Intra- i interdenní přesnost (CV %) se pohybovala v akceptovatelných mezích podle standardů TDM.

Přínosy a praktické využití metody

Plně automatizovaný pracovní tok snižuje zatížení laboratorního personálu, minimalizuje chyby spojené s manuálními kroky, optimalizuje spotřebu reagencií a zvyšuje kapacitu pracovní linky. Výsledná metoda je vhodná pro rutinní terapeutický monitoring v nemocničních i komerčních laboratořích.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další rozvoj může zahrnovat rozšíření panelu sledovaných látek, adaptaci pro jiné biologické matice (moč, cerebrospinální mok), integraci s laboratorními informačními systémy a využití strojového učení pro predikci farmakokinetických parametrů pacientů.

Závěr

Plně automatizovaný systém CLAM-2000 v kombinaci s LC–MS/MS představuje robustní, rychlou a vysoce přesnou platformu pro terapeutický monitoring antiepileptik. Eliminace manuálních kroků zvyšuje objem vyšetření, spolehlivost výsledků a zároveň snižuje náklady na analýzu.

Reference

• Vecchietti D., Ghilardi C., Kern K., Moreau S., Cabruja I. Therapeutic drug monitoring of Antiepileptic drugs in serum: a fully automated approach. ASMS 2017, TP450.
• Shimadzu Italia; Shimadzu Europe GmbH; RECIPE Chemicals + Instruments GmbH. ClinMass® TDM Kit System Application Notes, 2017.