Simultaneous Determination of Vitamins A and E in Infant Formula by ACQUITY UPC2 with PDA Detection

Význam tématu

Stanovení vitamínů A a E v kojenecké výživě je klíčové pro zajištění správné výživy a bezpečnosti výrobků určených pro kojence. Rychlé a přesné kvantifikace těchto tuků rozpustných vitamínů pomáhají výrobcům splnit legislativní požadavky a zajistit kvalitu konečného produktu.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo ověřit možnost současného stanovení retinylacetátu, retinylpalmitátu (cis a trans formy) a alfa-tokoferylacetátu a alfa-tokoferolu v komerčních vzorcích kojenecké výživy za použití UltraPerformance Convergence Chromatography (UPC2) s PDA detekcí na systému ACQUITY UPC2.

Použitá metodika a instrumentace

Vzorky byly připraveny jednoduchou extrakcí kapalina-kapalina bez saponifikace. Oddělovací chromatografie probíhala na kolonce ACQUITY UPC2 HSS C18 SB (3,0 × 100 mm, 1,8 µm) při gradientním eluce s fází CO2 a methanolem (3 až 10 % methanolu). Detekce probíhala u retinylesterů při 320 nm, u alfa-tokoferylacetátu při 283 nm a u alfa-tokoferolu při 293 nm.

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda dosáhla vynikající separace všech šesti analytů včetně cis a trans forem retinylesterů. Lineárnost metod byla potvrzena koeficienty R2 nad 0,995. Meze kvantifikace se pohybovaly od 0,3 do 13 µg/mL. Celkový cyklus analýzy včetně ekvilibrace kolony trval osm minut, což představuje třetinový čas ve srovnání s tradičními HPLC metodami. Spotřeba methanolu byla 0,9 mL na injekci, tedy o 90 % nižší než u referenčního normální fáze LC.

Přínosy a praktické využití metody

• Zkrácení doby analýzy na třetinu oproti konvenčním postupům
• Minimalizace spotřeby organického rozpouštědla a snížení ekologické zátěže
• Jednoduchá příprava vzorku bez časově náročné saponifikace
• Vysoká přesnost, opakovatelnost a nízké meze detekce vhodné pro rutinní kontrolu kvality

Budoucí trendy a možnosti využití

UPC2 by mohla být dále rozšiřována o stanovení dalších tuků rozpustných vitamínů a jejich izomerů. S narůstající poptávkou po ekologických metodách se očekává širší implementace superkritické chromatografie v potravinářském i farmaceutickém průmyslu. Další vývoj může směřovat ke zkrácení doby přípravy vzorku a plné automatizaci analytického procesu.

Závěr

Použití ACQUITY UPC2 s PDA detekcí umožňuje rychlé, citlivé a ekologické simultánní stanovení vitamínů A a E v kojenecké výživě. Metoda nabízí výrazné zkrácení analýzy, snížení spotřeby rozpouštědel a vynikající analytické parametry, což jí předurčuje pro rutinní laboratorní praxi.

Reference

• DeVries JW, Silvera KR. Determination of vitamins A (retinol) and E (alpha-tocopherol) in foods by liquid chromatography collaborative study J AOAC International 2002 85 424
• Chavez-Servin JL, Castellote AI, Lopez-Sabater MC Simultaneous analysis of Vitamins A and E in infant milk-based formulae by normal-phase HPLC-DAD using a short narrow-bore column J Chromatogr A 2006 1122 138
• Aubin A Analysis of Fat-Soluble Vitamin Capsules Using UltraPerformance Convergence Chromatography UPC2 Waters Application Note 720004394en 2012
• ACQUITY UPC2 System brochure 2012 p n 720004225en 2012