Transferring HPLC Gradient Methods Using CORTECS Solid-Core Particle Columns

Význam tématu

Rychlá a efektivní chromatografie hraje klíčovou roli v kvalitativní a kvantitativní analýze farmaceutických látek. Optimalizace gradientních HPLC metod přenosem z běžných plně pórovitých sloupců na sloupce se solid-core částicemi umožňuje významné snížení doby analýzy, spotřeby rozpouštědla a nákladů na vzorek, a to při zachování chromatografické selektivity a rozlišení.

Cíle a přehled studie / článku

Studie demonstruje přenos standardní HPLC gradientní metody pro stanovení abacaviru a jeho příbuzných látek ze sloupce C18 5 µm, 4,6 × 150 mm na sloupec CORTECS C18 2,7 µm, 4,6 × 75 mm, přičemž se zachovávají kritické chromatografické parametry a výrazně se zvyšuje analytický výkon.

Použitá metodika a instrumentace

Metoda byla převzata z původního nastavení s mobilní fází A (0,1 % trifluoroctová kyselina ve vodě) a B (85 % methanol ve vodě), gradient 95→10 % A během 38,4 min při průtoku 1,0 mL/min. Při přechodu na CORTECS C18 2,7 µm byl sloupec zkrácen na 75 mm a průtok upraven na 1,85 mL/min, objem injekce zmenšen z 8 µL na 4 µL. Gradientní časy byly upraveny tak, aby byl zachován stejný počet objemů kolony.

• HPLC systém: Waters Alliance s TUV detektorem (2489).
• Sloupec: CORTECS C18, 2,7 µm, 4,6 × 75 mm.
• Softwarové řízení a zpracování dat: Empower 3.
• Mobilní fáze: 0,1 % trifluoroctová kyselina ve vodě (A), 85 % methanol ve vodě (B).
• Detekce: UV při 254 nm.

Hlavní výsledky a diskuse

Přenos metody na CORTECS sloupec zachoval selektivitu a uspokojivé USP rozlišení kritických párů analytů (2,7 a 4,1). Doba analýzy se zkrátila z 50 min na 15 min (~4× rychlejší), spotřeba acetonitrilu klesla z 20,8 mL/run na 10,5 mL/run (~2× úspora). Generované podtlaky (4 400 psi) jsou pod limitem 5 000 psi běžných HPLC přístrojů.

Přínosy a praktické využití metody

Implementace CORTECS sloupců ve zkušených laboratořích přináší:

• Výrazné zrychlení rutinních analýz a vyšší kapacitu vzorků.
• Nižší spotřebu organického rozpouštědla a finanční úspory.
• Možnost rychlého nasazení v QA/QC farmaceutickém průmyslu.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další směřování spočívá v rozvoji ultra-vysokotlakých HPLC systémů (UHPLC) a zdokonalování nanotechnologií částic, což umožní další snížení rozměrů sloupců, zkrácení analýz a další ekologickou redukci spotřeby rozpouštědel. Integrace s automatizovanými systémy a pokročilou chemometrickou analýzou podpoří vysokopropustné screeningové aplikace.

Závěr

Přenos gradientních HPLC metod na sloupce s pevnou jádrovou strukturou prokázal výrazné zkrácení doby analýzy, snížení spotřeby rozpouštědel a zachování chromatografických parametrů. Sloupce CORTECS C18 2,7 µm se tak jeví jako efektivní volba pro moderní farmaceutickou analýzu.

Reference

Jonathan E. Turner, Bonnie A. Alden, Mia Summers, Kenneth Berthelette, Kenneth J. Fountain. Transferring HPLC Gradient Methods Using CORTECS Solid-Core Particle Columns. Waters Corporation, 2014.