THE APPLICABILITY OF 2.7 μm SOLID-CORE COLUMNS FOR HIGH THROUGHPUT ANALYSIS

Význam tématu

Růst požadavku na rychlé a spolehlivé chromatografické analýzy v biochemii a farmaceutickém výzkumu klade důraz na optimalizaci parametrů HPLC. Použití látek s pevnou jádrovou strukturou (solid-core) umožňuje významné zkrácení doby analýzy při zachování nebo zlepšení rozlišení.

Cíle a přehled studie

Studie se zaměřila na přenos analytické metody pro stanovení abacaviru a jeho čtyř známých příbuzných látek z běžně používané plně porézní C18 kolony (5 µm, 4,6×150 mm) na zkrácenou CORTECS 2,7 µm kolonu (4,6×75 mm). Porovnání bylo založeno na čase analýzy, rozlišení, zpětném tlaku a životnosti kolony.

Použitá metodika a instrumentace

• Kolony: plně porézní C18 5 µm, 4,6×150 mm vs CORTECS C18 2,7 µm, 4,6×75 mm
• Mobilní fáze A: 0,1 % TFA ve vodě; B: 85 % metanol ve vodě
• Průtok: z 1,00 mL/min na 1,85 mL/min
• Objem injekce: z 8 µL na 4 µL
• Detekce UV (254 nm)
• Přístroj: Waters® Alliance HPLC

Hlavní výsledky a diskuse

Výsledky prokázaly, že při zachování podobného rozlišení kritických párů špiček (USP rozlišení ~2,7–4,1) došlo k přibližně čtyřnásobnému zkrácení doby analýzy z 44,9 min na 12,1 min. Navíc byly naměřeny nižší než očekávané hodnoty zpětného tlaku a stabilita kolony zůstala konstantní i po 1000 opakovaných injekcích srážkovaného plazmatického extraktu.

Přínosy a praktické využití metody

• Přímý přenos existujících 5 µm metod na 2,7 µm solid-core kolony bez ztráty výkonu
• Výrazné zvýšení propustnosti laboratoře a snížení doby analýzy
• Možnost aplikace v jednoduchých přípravách biologických vzorků s minimální úpravou

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se rozšíření využití solid-core technologií v oblasti vysoce výkonné chromatografie, zejména pro aplikace vyžadující minimalizaci času analýzy a snížení tlakových nároků. Trendem je další miniaturizace a kombinace s MS detekcí pro komplexnější profilování biologických a farmaceutických vzorků.

Závěr

Solid-core kolony CORTECS 2,7 µm představují efektivní nástroj pro zrychlené a přitom citlivé HPLC analýzy. Umožňují přenos osvědčených metod, zvyšují výkon laboratoře a zajišťují dlouhodobou stabilitu při vyšších průtocích.

Reference

• J.W. Dolan, LCGC North Am., 32(2), 98-102 (2014)
• J.W. Dolan, LCGC North Am., 32(3), 188-193 (2014)