Confirmation and Quantitation of Six Opiates in Urine Using the ISQ Single Quadrupole GC-MS

Význam tématu

Opiáty představují významnou skupinu látek v klinické toxikologii a forenzní praxi. Monitorování jejich přítomnosti v biologických matricích slouží k ověření zneužívání léčiv, drogové komunikace a právním účelům.

Cíle a přehled studie

Studie popisuje vývoj a validaci metodiky pro současné potvrzení a kvantifikaci šesti opiátů (codein, morfin, hydrokodon, hydromorfon, oxykodon, oxymorfon) v lidské moči pomocí single quadrupole GC-MS systému ISQ.

Použitá metodika

Proces přípravy vzorku zahrnoval:

• Hydrolýzu glukuronidových konjugátů k uvolnění vázaných opiátů
• Dvojitou derivatizaci – přeměna keto skupin na oximy a následná trimethylsilylace (BSTFA + 1 % TMCS)
• SPE extrakci s HyperSep Verify-CX kolónami (200 mg, 10 mL)
• Chromatografii na TraceGOLD TG-1MS analytické kolóně (15 m × 0,25 mm × 0,25 µm)
• Detekci v režimu SIM (tři ionty pro analyty, dva ionty pro deuterované interní standardy)
• Automatizované zpracování dat a kvantifikaci v softwaru ToxLab Forms

Použitá instrumentace

• Thermo Scientific ISQ single quadrupole GC-MS
• Thermo Scientific TRACE GC Ultra
• Thermo Scientific AS 3000 II autosampler
• TraceGOLD TG-1MS analytická kolona
• HyperSep Verify-CX SPE kolony
• ToxLab Forms software

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda zajistila úplnou separaci šesti opiátů bez vzájemných interferencí i matricových rušení. Lineární rozsah činí 30–5000 ng/mL pro většinu látek (30–1200 ng/mL pro oxymorfon) s koeficienty determinace R2 ≥ 0,996. Intra a inter-batch precize (CV) byla < 5 % při kontrolních hladinách 120 ng/mL a 375 ng/mL. Meze kvantifikace dosahují 30 ng/mL při vzorkovací velikosti 2 mL.

Přínosy a praktické využití metody

Jednotná extrakce a jedna analytická dávka urychlují zpracování vzorků a snižují náklady. Metoda poskytuje robustní kvalifikaci i kvantifikaci v jednom běhu a minimalizuje manuální zásahy díky automatizovanému softwarovému workflow.

Budoucí trendy a možnosti využití

V dalším vývoji lze očekávat vysokoprůchodovou analýzu rozšířených panelů drog, integraci vysoce rozlišovací MS, on-line SPE a miniaturizaci přípravy vzorků. Rozšíření na LC-MS/MS umožní pokrytí širšího spektra analyzovaných látek.

Závěr

Navržená GC-MS metoda na platformě ISQ s optimalizovaným režimem SIM a dvojitou derivatizací splnila přísné požadavky na linearitu, přesnost, citlivost i specifitu. Je vhodná pro rutinní forenzní a klinickou toxikologii.

Reference

1. Baselt R Disposition of Toxic Drugs and Chemicals in Man 8th ed Biomedical Publications Foster City 2008
2. Ropero-Miller JD Lambing MK Winecker RE Simultaneous Quantification of Opiates in Blood by GC-EI-MS Analysis Following Deproteination Detautomerization of Keto Analytes Solid Phase Extraction and Trimethylsilyl Derivatization J Anal Toxicol 2002 26 524–528