Method Transfer from an Agilent 1100 Series Quaternary LC to an Agilent 1260 Infinity II LC

Význam tématu

Výměna chromatografických metod mezi staršími a novými LC systémy umožňuje zachovat validitu a kvalitu analytických měření bez nutnosti opětovného rozsáhlého vývoje metodik. Transfer metody z Agilent 1100 Series Quaternary LC na Agilent 1260 Infinity II LC přináší vyšší provozní tlak, lepší efektivitu a úsporu času a rozpouštědel, což je klíčové zejména pro farmaceutické a kontrolní laboratoře.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo prokázat ekvivalenci výsledků konvenční LC metody pro analýzu antihistaminik při přechodu z Agilent 1100 Series na Agilent 1260 Infinity II LC. Dále bylo ověřeno, že převod na UHPLC podmínky optimalizované pro rozlišení i rychlost na 1260 Infinity II LC poskytuje vyšší rozlišení, kratší analýzy a úsporu rozpouštědel.

Použitá metodika a instrumentace

Pro konvenční LC se použila kolona ZORBAX SB-C18 (4.6×150 mm, 5 µm), pro UHPLC kolony Poroshell 120 EC-C18 (3.0×150 mm, 2.7 µm a 3.0×50 mm, 2.7 µm). Mobilní fáze byla tvořena 25 mM fosfátovým pufrem pH 3 a acetonitrilem. Gradienty a průtoky byly přizpůsobeny pro jednotlivé režimy: konvenční (1.5 mL/min, 25 min), UHPLC pro rozlišení (1.2 mL/min, 13.3 min) a UHPLC pro rychlost (2.5 mL/min, 2.13 min). Detekce DAD při 204 nm, referenční 360 nm.

Použitá instrumentace

• Agilent 1100 Series Quaternary Pump, Autosampler, Degasser, Column Compartment, Diode Array Detector
• Agilent 1260 Infinity II Quaternary Pump, Vialsampler s chlazením, Column Compartment, Diode Array Detector WR
• OpenLAB CDS verze 2.1 pro řízení a zpracování dat

Hlavní výsledky a diskuse

Přenos metody pro konvenční LC mezi přístroji prokázal maximální odchylku retenčních časů –1.7 % a mírné zlepšení rozlišení. UHPLC podmínky umožnily zvýšit rozlišení dvojic analytů až z 2.3 na 5.4, snížit délku analýzy až o 91 % a spotřebu rozpouštědel až o 86 %. Při optimalizaci pro rychlost byly dosaženy chromatogramy během 2.13 min s dostatečným rozlišením pro QC účely.

Přínosy a praktické využití metody

• Zachování validity původní metody při přechodu na moderní LC systém
• Možnost širšího využití UHPLC kolón bez změny mobilních fází
• Výrazná úspora času a nákladů na chemikálie
• Flexibilita v optimalizaci metody pro rozlišení nebo rychlost

Budoucí trendy a možnosti využití

Vývoj LC instrumentace směřuje k ještě vyššímu provoznímu tlaku a rychlostem analýzy, což umožní rychlejší screening a vysokokapacitní aplikace. Integrace s pokročilými softwarovými nástroji pro správu dat a automatizované reportování dále usnadní validaci a audit v regulovaných laboratořích. Využití Poroshell technologií se bude rozšiřovat do multi-analyz a komplexních matic.

Závěr

Studie potvrdila ekvivalenci mezi Agilent 1100 Series a Agilent 1260 Infinity II LC pro konvenční LC analýzu antihistaminik a ukázala benefity přechodu na UHPLC podmínky při optimalizaci pro rozlišení i rychlost. Tím se otevírají možnosti efektivnějších a úspornějších analýz v oblasti farmaceutické kontroly kvality.

Reference

• Agilent Technologies. Agilent 1290 Infinity with ISET User Manual, 2015.
• Panula a kol. International Union of Basic and Clinical Pharmacology XCVIII. Histamine Receptors. Pharmacological Reviews 2015; 67:601–655.