Analytical Method Development for USP Related Compounds in Paclitaxel Using an Agilent Poroshell 120 PFP

Význam tématu

Paclitaxel je významné protinádorové činidlo používané v klinické onkologii. Kontrola kvality jeho příbuzných sloučenin je zásadní pro zajištění účinnosti a bezpečnosti léčby. Metody popsané v monografii USP vyžadují spolehlivou chromatografickou separaci a detekci impurit.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem studie je ověřit a optimalizovat USP metodu pro stanovení příbuzných sloučenin v paclitaxelu pomocí superficially porous Agilent Poroshell 120 PFP kolony (4,6×250 mm, 4 µm) a následně metodu převést na úspornější verzi (3,0×100 mm, 2,7 µm) se zkrácenou dobou analýzy a nižší spotřebou rozpouštědel.

Použitá metodika a instrumentace

• LC systém: Agilent 1290 Infinity s binární pumpou, autosamplerem, termostatem kolony a diode array detektorem nastaveným na 227 nm
• Kolony: Poroshell 120 PFP 4,6×250 mm 4 µm, PFP 3,0×100 mm 2,7 µm; pro komparaci Poroshell 120 EC-C18 4,6×100 mm 2,7 µm
• Mobilní fáze: voda/acetonitril 55:45 izokraticky pro srovnání selektivity; gradientní režim pro test system suitability dle USP
• Podmínky: teplota 30 °C; průtok 2,6 mL/min (4,6 mm), 1,1 mL/min (3,0 mm); objem injekce 10 µL (4,6 mm), 2 µL (3,0 mm)

Hlavní výsledky a diskuse

PFP fáze vykázala lepší rozlišení izomerů a impurit paclitaxelu při krátkých retenčních časech než EC-C18. System suitability testy potvrdily splnění požadavků USP (relativní retence A = 0,75; B = 0,81; rozlišení Rs > 2; RSD < 2 %). Transfer na úzkou kolonu umožnil zkrácení analýzy z 80 na 32 minut a významnou úsporu organických rozpouštědel, přičemž kvalita separace zůstala zachována.

Přínosy a praktické využití metody

Navržená metoda nabízí rychlé, citlivé a reprodukovatelné stanovení příbuzných látek paclitaxelu v souladu s USP. Úspora času a rozpouštědel zvyšuje efektivitu rutinních analýz v QA/QC laboratořích farmaceutického průmyslu.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další vývoj může zahrnovat přechod na UHPLC formáty s partikulí pod 2 µm, rozšíření stacionárních fází či kombinaci s hmotnostní detekcí pro zvýšení citlivosti a selektivity. Metodika je přenosná i na jiné přírodní produkty a léčiva.

Závěr

Agilent Poroshell 120 PFP je vhodnou stacionární fází pro USP analýzu příbuzných sloučenin v paclitaxelu. Přenos metody na užší kolonu přinesl výrazné časové a solventní úspory bez kompromisů ve výkonu chromatografie.

Reference

1. USP Paclitaxel, United States Pharmacopeia 35 NF 30, United States Pharmacopeia, Rockville, MD, USA
2. Long W, Horton J. Analysis of Positional Isomers with Agilent Poroshell 120 PFP Columns; Application note 5991-4373EN, 2014
3. Fu R, Zhang L. Analysis of Positional Isomers in Lapatinib with Agilent Poroshell 120 PFP Columns; Application note 5991-5262EN, 2014
4. Long W, Brooks A, Zou Y. Improved Simvastatin Analysis Using Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18 Columns; Application note 5990-3883EN, 2009