Analysis of Geniposidic Acid and Chlorogenic Acid in Tochu Tea Using a Triple Quadrupole LC/MS/MS [LCMS-8030]

Význam tématu

Tochu čaj z Eucommia ulmoides patří mezi tradiční čínské léčivé přípravky a obsahuje významné množství geniposidové a chlorogenové kyseliny. Obě sloučeniny vykazují farmakologickou aktivitu – geniposidová kyselina ovlivňuje krevní tlak, chlorogenová kyselina má antioxidační účinky. Přesná kvantifikace těchto látek je klíčová pro zajištění kvality a účinnosti produktu.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem bylo vyvinout a validovat spolehlivou kvantitativní metodu pro současné stanovení geniposidové a chlorogenové kyseliny v extraktu tochu čaje pomocí LC/MS/MS s triple kvadrupólem. Studie demonstruje optimalizaci MS/MS podmínek, kalibrační charakteristiky a analýzu reálného vzorku čaje.

Použitá metodika

Vzorek tochu čaje se připravil třemi 10minutovými extrakcemi 20 g listů vroucí vodou (celkem 300 mL), po ochlazení a smíchání se objem doladil na 1 L a vzorek zředil 1 000krát. Následovalo filtrování na 0,2 µm membráně.
Chromatografie proběhla na koloně Shim-pack VP-ODS (150 × 2,0 mm, 5 µm) s gradientem 0,1 % kyseliny mravenčí ve vodě (A) a acetonitrilu s 0,1 % kyseliny mravenčí (B): 10 % B→20 % B (0–10 min)→10 % B (10,01–20 min). Průtok 0,2 mL/min, teplota kolony 40 °C, objem injekce 2 µL.

Použitá instrumentace

• Systém: Shimadzu LCMS-8030 (triple kvadrupól)
• Ionizace: ESI v negativním módu, napětí –3,5 kV
• Temperatury: DL 300 °C, block heater 500 °C
• Plyny: sušicí plyn 20 L/min, neutrální plyn 1,5 L/min

Hlavní výsledky a diskuse

MS/MS spektra ukázala charakteristické přechody [M–H]– m/z 373→123 pro geniposidovou kyselinu a m/z 353→191 pro chlorogenovou kyselinu. Ve MRM módu byla dosažena vynikající linearita v širokém dynamickém rozsahu (5–10 000 ppb pro geniposidovou, 5–5 000 ppb pro chlorogenovou kyselinu, R²>0,999). Analýza 1 000násobně zředěného extraktu ukázala koncentrace 600–700 ppb obou látek, tedy průměrně 600–700 ppm v původním čaji, bez významného rušení od matrice.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda umožňuje rychlé a přesné stanovení klíčových bioaktivních polyfenolů v složitých rostlinných matricích. Je vhodná pro kontrolu kvality tradičních čajových extraktů, standardizaci dávkování a výzkum farmakologických účinků.

Budoucí trendy a možnosti využití

Dalšími kroky je rozšíření analýzy o další iridoidní a fenolické sloučeniny v Eucommia ulmoides, automatizace přípravy vzorků a zavedení vysoce výkonných hmotnostních spektrometrů s iontovou mobilitou pro zvýšení selektivity a citlivosti.

Závěr

Vyvinutá LC/MS/MS metoda pro simultánní kvantifikaci geniposidové a chlorogenové kyseliny v tochu čaji prokázala výbornou linearitu, citlivost i reprodukovatelnost. Přístrojová konfigurace a příprava vzorků zajišťují rychlou a spolehlivou analýzu pro potřeby výzkumu i průmyslové kontroly kvality.

Reference

• Shimadzu Application News No. C82, 2012: Analysis of Geniposidic Acid and Chlorogenic Acid in Tochu Tea Using LCMS-8030.