Applying Japanese pharmacopeia draft purity test methods to atrovastatin calcium hydrate impurity profiling using 2D-LCMS-IT-TOF system

Význam tématu

Profylace nečistot ve farmaceutických výrobcích je klíčová pro zajištění bezpečnosti a kvality léčiv. Při uvádění generických léků na trh je nutné splnit přísné požadavky farmakopei, například japonské, aby se prokázala ekvivalence originálního léčiva. Analýza nečistot atorvastatinu vápenatého využívající 2D-LCMS-IT-TOF systém přináší vysokou citlivost a přesnost při profilování minoritních i majoritních komponent.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem studie bylo ukázat aplikaci návrhových postupů japonské farmakopeje (JP) pro test čistoty atorvastatinu vápenatého hydrá­tu pomocí dvoudimenzionální LCMS s iontovou pastí a TOF detektorem. Auto­matizovaný 2D-LC systému umožňuje oddělit až 19 zjištěných nečistot, identifikovat je a stanovit jejich relativní zastoupení.

Použitá metodika a instrumentace

Rozdělení do dvou chromatografických rozměrů:

• 1stD LC: Shim-pack VP-ODS kolona (4.6×250 mm, 4.6 µm), mobilní fáze A: citrátový pufr pH 5.0/ACN/THF (4/1/1), B: ACN/THF (1/1), gradient 7→40 % po 80 min, 40 °C, detekce UV 254 nm.
• 2ndD LCMS: Shim-pack XR-ODS kolona (2.0×50 mm, 2.2 µm), mobilní fáze A: 10 mM acetátový pufr pH 5.0, B: ACN, gradient 7→40 % po 10 min, 40 °C, detekce MSn s vysokou hmotnostní přesností.

Hlavní výsledky a diskuse

UV chromatogram odhalil 19 nečistot, z nichž 10 mělo plochu nad 0.1 %. Dvoudimenzionální analýza prokázala 23 unikátních složek. Klíčové body:

• Impurity 3 byla na základě m/z 717 identifikována jako EP impurita F díky MSn spektru s vysokou přesností.
• I minoritní impurita 2 (0.013 % plochy) poskytla kvalitní spektrum díky selektivnímu přenosu vrcholu do MS.
• Impurity 6 tvořily dvě koelutující složky (m/z 541 a 557), které byly úspěšně frakcionovány a rozlišeny.

Přínosy a praktické využití metody

Dvoudimenzionální LCMS-IT-TOF systém umožňuje:

• Citlivou detekci i minoritních nečistot pod 0.05 %.
• Automatizované frakcionování a přesnou identifikaci pomocí MSn.
• Splnění přísných požadavků farmacopoeálních testů pro registraci generik.

Budoucí trendy a možnosti využití

Rozvoj 2D-LCMS směřuje k vyššímu rozlišení a rychlosti analýz. Potenciální aplikace:

• Profilování komplexních multikomponentních směsí v biotechnologiích a přírodních produktech.
• Integrace s hyfenovou spektroskopií pro rozšířenou charakterizaci struktur.
• Využití umělé inteligence pro automatizovanou interpretaci MSn dat.

Závěr

Aplikace návrhových metod japonské farmakopeje v 2D-LCMS-IT-TOF analýze atorvastatinu vápenatého úspěšně odhalila a identifikovala klíčové nečistoty s vysokou citlivostí a přesností, což podporuje rychlejší vývoj a registraci generických léčiv.

Reference

• Žádné literární odkazy nebyly v původním textu uvedeny