Analysis of Risedronate According to USP Using the Agilent 1260 Infinity Bio-inert Quaternary LC System

Význam tématu

Risedronát sodný patří mezi bisfosfonáty využívané při léčbě osteoporózy, Pagetovy choroby a dalších kostních onemocnění. Precizní kvantitativní stanovení jeho obsahu v léčivých formách je zásadní pro dodržení farmaceutických standardů, zajištění bezpečnosti a účinnosti léčby.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo vyvinout a validovat analytickou metodu podle monografie U.S. Pharmacopeia pro stanovení risedronátu sodného v substanci i tabletách (Actonel 5 mg) za využití bio-inertního kapalinového chromatografu Agilent 1260 Infinity.

Použitá metodika a instrumentace

• Agilent 1260 Infinity Bio-inert Quaternary LC System s metal-free proudovou cestou
• Pumpa G5611A, autosampler G5667A, termostaty G1330B a G1316C, DAD G1315D
• Kolona: iontovýměnná aniontová, 4×250 mm, 10 µm + předkolona 4×50 mm
• Mobilní fáze: 4,8 mM EDTA, pH 9,5; průtok 0,8 mL/min; injekční objem 20 µL
• Detekce: 263 nm, referenční filtrace vypnuta; teplota vzorku 4 °C, kolony 25 °C
• Příprava vzorků a standardů podle USP instrukcí

Hlavní výsledky a diskuse

• Rozlišení mezi risedronátem a příměsí A bylo 3,02 (>2,3) a mezi risedronátem a příměsí C v tabletách 3,11 (>2,5).
• Tailing factor pro risedronát činil ≤1,39 (<1,6).
• Lineární rozsah 0,016–2 mg/mL s R²=1,00; LOD 0,254 µg/mL, LOQ 0,849 µg/mL.
• Precision (RSD) pro substance 0,15 %, pro tablety 0,17 %; přesnost v rozsahu 92,5–101,4 %.
• Obsahy risedronátu odpovídaly USP limitům: substance 100,9 % (98–102 %), tablety 102,4 % (90–110 %).

Přínosy a praktické využití metody

• Metal-free cesta minimalizuje interakci fosfátových skupin s kovovými částmi, zlepšuje tvar špiček.
• Metoda splňuje přísné požadavky USP pro kvalitativní i kvantitativní analýzu bisfosfonátů.
• Vhodné nasazení v rutinní QA/QC kontrole farmaceutických předpisů.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Rozšíření aplikace na další fosfátové léčivé látky a bioaktivní nukleotidy.
• Automatizace přípravy vzorků a on-line zpracování dat pro vyšší provozní efektivitu.
• Integrace s hmotnostní spektrometrií (LC-MS) pro detailní identifikaci degradantů.
• Další vývoj bio-inertních systémů s vyšším tlakovým rozsahem a rozšířenou životností kolony.

Závěr

Validated metoda na Agilent 1260 Infinity Bio-inert Quaternary LC System pro stanovení risedronátu sodného v substanci a tabletách poskytuje vynikající linearitu, citlivost, přesnost a splňuje všechny USP požadavky, což podporuje její nasazení ve farmaceutické výrobě a kontrole kvality.

Reference

• J. DeRuiter and R. Clark, Bisphosphonates: Calcium Antiresorptive Agents, Endocrine Module, 2002.
• H.M. Jeong et al., Risedronate increases osteoblastic differentiation and function through connexin 43, Biochemical and Biophysical Research Communications, 2013.
• Shi et al., Novel direct detection method for quantitative determination of intracellular nucleoside triphosphates using weak anion exchange LC/MS, Rapid Communications in Mass Spectrometry, 2002.
• Nagaoka et al., Adduct Formation at C-8 of Guanine on in vitro Reaction of the Ultimate Form of PhIP with 2-Deoxyguanosine and Its Phosphate Esters, Japanese Journal of Cancer Research, 1992.
• Analysis of phosphate compounds with the Agilent 1260 Infinity Bio-inert Quaternary LC System, Agilent Application Note 5991-0025EN, 2012.
• U.S. Pharmacopeia Monographs 35 for Risedronate: 4568–4571, 2012.