Analysis of Histamine and Tyramine Using Prominence Amino Acid Analysis System

Význam tématu

Putrefaktivní biogenní aminy histamin a tyramin vznikají mikrobiální dekarboxylací histidinu a tyrosinu. Při konzumaci potravin s vysokým obsahem těchto sloučenin hrozí potravinové otravy a migrénové reakce. Spolehlivá a rychlá analýza je tedy klíčová pro kontrolu kvality potravinářských výrobků, zejména rybích produktů, vín a fermentovaných potravin.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem studie bylo demonstrovat využití systému Prominence Amino Acid Analysis System pro separaci a kvantifikaci histaminu a tyraminu s post-column fluorescenční derivatizací OPA. Studie zahrnuje optimalizaci chromatografických podmínek, validaci metodiky a ukázkovou aplikaci na potravinové vzorky.

Použitá metodika a instrumentace

Analýza probíhala na systému Shimadzu Prominence vybaveném sloupcem Shim-pack Amino-Na (100×6,0 mm) a ammonia trapem Shim-pack ISC-30. Jako mobilní fáze byly použity kity Amino Acid Mobile Phase (Na typ, fáze B a C) v gradientu. Detekce probíhala pomocí post-column derivatizace ortho-phthalaldehydem (OPA) reagujícího s aminoskupinami, za teploty 60 °C a rychlostí proudu činící 0,2 mL/min. Fluorescenční detektor RF-20Axs byl nastaven na excitaci 350 nm a emisi 450 nm.

Hlavní výsledky a diskuse

Chromatogram standardního roztoku (10 mg/L) ukázal dobře separované píky histaminu (cca 9,97 min) a tyraminu (cca 11,87 min). Linearita v rozmezí 0,1–100 mg/L dosáhla koeficientů R2 ≥ 0,9998. Repeatabilita retence i plochy píků při 1 mg/L pro oba aminy vykázala %RSD pod 1,1 %. Aplikace na pitné vzorky (rybí omáčky, červené a bílé víno, sójové omáčky) demonstrovala vysokou citlivost a reprodukovatelnost i při 10× ředění a jednoduché filtraci.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda nabízí:

• Minimální přípravu vzorku (filtrace, ředění).
• Vysokou citlivost a selektivitu díky OPA derivatizaci.
• Široký rozsah kvantifikace (0,1–100 mg/L) a vynikající linearitu.
• Vhodnost pro rutinní QA/QC kontrolu v potravinářství.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další rozvoj může směřovat k:

• Automatizaci přenosu vzorků a derivatizace přímo na přístroji.
• Rozšíření metodiky na další biogenní aminy a aminokyseliny ve komplexních matricích.
• Integraci s hmotnostní spektrometrií pro zajištění vyšší selektivity a identifikace příměsí.

Závěr

Prominence Amino Acid Analysis System se ukázal jako efektivní nástroj pro kvantifikaci histaminu a tyraminu v potravinách. Kombinace jednoduché přípravy vzorku, výkonné separace a citlivé fluorescenční detekce zajišťuje spolehlivou rutinní analýzu klíčových biogenních aminů.

Reference

• Shimadzu Corporation. Analysis of Histamine and Tyramine Using Prominence Amino Acid Analysis System; Application Note No. L463, First Edition Sep. 2014.