Amplify Your Findings with fully integrated CE/MS - Agilent 7100 Capillary Electrophoresis System

Význam tématu

Capilární elektroforéza spojená s hmotnostní spektrometrií (CE/MS) představuje vysoce rozlišenou, rychlou a environmentálně šetrnou techniku pro analýzu nabitých molekul. Díky minimálním objemům vzorku, vynikající separační kapacitě a nízké spotřebě pufrů doplňuje konvenční HPLC a otevírá nové možnosti v proteomice, metabolomice, farmaceutické analýze i kvalitativní kontrole.

Cíle a přehled článku

Článek představuje kompletní řešení Agilent 7100 CE/MS jako jedinou jednofiremní platformu zahrnující kapilární elektroforézu, rozhraní pro ESI, širokou nabídku MS detektorů a jednotné softwarové řízení. Popisuje klíčové komponenty, novinky (JetStream kompatibilní sprayer, iFunnel technologie, integrace do MassHunter), a ilustruje aplikace na příkladech metabolomiky, peptidové mapy a kvantifikace drog.

Použitá metodika a instrumentace

Capilární elektroforéza probíhá v otevřené kapiláře (25–100 µm ID) pod elektrickým polem, separace je na základě poměru náboje a hmotnosti. Výstupní eluát je smíchán se sheath liquid (1–5 µL/min) přes robustní LC pumpu a přiveden do ESI / JetStream ionizačního zdroje. Celé řešení je řízeno z jednoho SW: OpenLAB CDS (ChemStation) nebo Agilent MassHunter (včetně ovládání CE). Instrumentace zahrnuje:

• Agilent 7100 CE
• Agilent 6000 MS portfólio (Q, QQQ, TOF, Q-TOF s iFunnel technologií)
• Sheath liquid pumpa a adaptér G1603A, sprayer G1607B
• Ionizační zdroje: standardní ESI, JetStream, APPI, APCI
• Další detektory: UV-DAD, LIF, CCD (vodivost)

Hlavní výsledky a diskuse

Aplikace demonstrované v článku ukazují:

• Metabolomika malých aniontů pomocí CE-TOF/MS s vysokým rozlišením a rychlostí analýzy.
• Peptidová mapa trávicího digestu BSA se sekvenčním pokrytím a spolehlivou identifikací pomocí Q-TOF.
• Kvantifikace drog z biologických matric s elektrokinetickým stackingem a iFunnel QQQ detekcí dosahující limitů v ppt oblasti.

Diskuse zdůrazňuje robustnost rozhraní, stabilitu proudu a flexibilitu v chemických podmínkách separace i ionizace.

Přínosy a praktické využití metody

Integrované CE/MS řešení nabízí:

• Extrémně vysoké rozlišení (často >100 000 destiček) a rychlé analýzy (minuty).
• Sníženou spotřebu vzorku (nL injekce) a pufrů (mL).
• Možnost nativních separací biomolekul bez denaturace.
• Širokou škálu kompatibilních detektorů a modulární rozšíření.
• Jedno softwarové prostředí s LabAdvisor diagnostikou.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další vývoj bude směřovat k:

• Rozšíření JetStream a iFunnel technologií pro vyšší citlivost malých molekul.
• Automatizaci a online integraci s mikrodestičkami pro vysokoprodukční screening.
• Přizpůsobení pro klinické a regulované laboratoře s certifikací.
• Pokročilé softwarové moduly pro hlubokou data mining a bioinformatiku v proteomice a metabolomice.

Závěr

Agilent 7100 CE/MS představuje plně integrovanou platformu s jednofiremní podporou, která spojuje excelentní separační výkon capilární elektroforézy s flexibilitou a citlivostí moderních hmotnostních spektrometrů. Robustní mechanické rozhraní, variabilní ionizační zdroje a jednotné SW řízení činí z tohoto řešení univerzální nástroj pro výzkum i rutinní analýzy.

Reference

• Greiner M. Agilent 7100 Capillary Electrophoresis System, January 2013.
• Kohler I. et al., University of Geneva, kvantifikace drog metodou CE/MS.
• Agilent Pub. No. 5990-7138EN: BioConfirm Protein Analysis Peptide Matching Results.