Streamlined Method Validation for Analysis of Formoterol Fumarate and Budesonide in Metered Dose Inhaler with Empower Method Validation Manager Software

Význam tématu

Validace analytické metody je klíčová pro zajištění přesnosti, spolehlivosti a shody laboratorních výsledků s regulatorními požadavky. Urychlená a transparentní procedura validačního procesu zkracuje čas uvedení metody do rutinní kontroly léčiv a snižuje riziko chyb při měření účinných látek.

Cíle a přehled studie

Cílem bylo ověřit vhodnost UPLC metody pro simultánní stanovení formoterol fumarátu a budesonidu v dávkovacím inhalátoru (Symbicort) podle doporučení USP a ICH. Studie zahrnovala definování akceptačních kritérií pro lineární rozsah, přesnost, opakovatelnost, mezilehlou přesnost, specificitu a robustnost a ukázala přínosy softwaru Empower 3 Method Validation Manager (MVM) při řízení celého validačního procesu.

Použitá metodika

Vzorky se připravily rozpuštěním API ve methanolu a ředěním mobilní fází (20 mM octan amonný pH 8,2 : acetonitril 70 : 30). Pracovní roztoky obsahovaly 80 µg/ml budesonidu a 4,5 µg/ml formoterolu. Chromatografické podmínky: ACQUITY UPLC BEH C18 1,7 µm, 2,1×100 mm, 33 °C, gradient 95→40 % fáze A (20 mM octan amonný) vs. B (acetonitril), průtok 0,35 ml/min, detekce PDA 244 nm a hmotnostní detektor QDa (ESI+) m/z 150–475.

Použitá instrumentace

• ACQUITY UPLC H-Class PLUS
• ACQUITY UPLC BEH C18 kolona
• ACQUITY UPLC PDA detektor
• ACQUITY QDa mass detector
• Empower 3 Chromatography Data Software a Method Validation Manager

Hlavní výsledky a diskuse

Lineární závislost kalibrační křivky obou látek prokázala R2 ≥ 0,999 v rozsahu 80–120 % pracovní koncentrace. Přesnost (recovery) se pohybovala v rozmezí 97,8–101,5 % s %RSD ≤ 1,42 %. Opakovatelnost i mezilehlá přesnost splnily kritéria ± 5 % recovery a ≤ 2 % RSD. Specificita byla potvrzena oddělením spřízněných látek s USP rozlišením ≥ 2,0 a homogenitou spekter UV a MS. Robustnost DOE prokázala stabilní USP rozlišení i při změnách teploty ± 2 °C a průtoku ± 0,05 ml/min. Empower 3 MVM významně zrychlil tvorbu protokolů, vyhodnocení statistiky a generování závěrečných reportů, současně zajišťoval zpětnou sledovatelnost a elektronické schvalování kroků validačního plánu.

Přínosy a praktické využití metody

Validated UPLC metoda umožňuje spolehlivé rutinní stanovení formoterolu a budesonidu v dávkovaných inhalátorech s vysokou citlivostí a selektivitou. Softwarové řízení validačního procesu zajišťuje úplnou auditovatelnou trasu dat, rychlejší dokončení testů a okamžité označení OOS výsledků, což usnadňuje implementaci do QC laboratoře.

Budoucí trendy a možnosti využití

· Rozšíření QbD přístupu pro prediktivní optimalizaci metod
· Integrace kontinuálního monitoringu výkonnosti skrze kontrolní grafy
· Propojení s laboratořskými informacemi (LIMS) pro automatizované zpracování dat
· Využití pokročilých statistických nástrojů a AI pro včasnou detekci trendů a odchylek

Závěr

Studie potvrdila, že UPLC metoda ve spojení s Empower 3 MVM splňuje regulační požadavky na validaci a poskytuje robustní nástroj pro kvantitativní stanovení formoterolu a budesonidu. Softwarové řízení validačního procesu zrychluje práci laboratorních specialistů a zajišťuje plnou shodu s GMP a USP standardy.

Reference

1. FDA Guidance for Industry: Analytical Procedures and Methods Validation for Drugs and Biologics, 2015.
2. USP General Chapter <1225> Validation of Compendial Procedures, USP 36-NF31, 2013.
3. ICH Q2B Validation of Analytical Procedures, 1996.
4. Proposed USP General Chapter <1220> Analytical Procedure Lifecycle, Pharmacopeial Forum 43(1), 2017.
5. Salem YA et al. J Chrom Sci. 2017;55:1013–1020.
6. Alkhateeb FL, Rainville P. Waters Application Note 720006654EN, 2019.
7. USP General Chapter <621> Chromatography, USP36-NF31, 2013.
8. Maziarz M et al. Waters White Paper 720006581EN, 2019.