MassHunter MRM/dMRM/tMRM Database - Familiarization Guide

Význam tématu

Metoda vícereakčního monitorování (MRM) a její dynamické (dMRM) a spouštěné (tMRM) varianty představují špičkový přístup pro vysoce selektivní a citlivou kvantitativní analýzu cílených látek v komplexních matricích. Jsou klíčové pro průmyslovou kontrolu kvality, environmentální monitoring, potravinářskou bezpečnost a farmaceutický výzkum.

Cíle a přehled studie / článku

Průvodce usiluje o seznámení uživatele s databází MassHunter MRM/dMRM/tMRM a kroky tvorby metod od základního MRM přes optimalizované dMRM až po vysoce selektivní tMRM metodu. Na modelovém mixu pesticidů popisuje: import přechodů, akvizici dat, automatickou aktualizaci metod, nastavení trigger parametrů a tvorbu referenční knihovny.

Použitá metodika a instrumentace

Práce sleduje tři hlavní fáze:

• Vytvoření MRM metody importem přechodů z MassHunter databáze, akvizice a verifikace v Qualitative Analysis.
• Transformace MRM do dMRM pomocí reportu z Quantitative Analysis, nastavení retenčních oken a cyklů, kontrola dwell time v Dynamic MRM Vieweru.
• Rozšíření dMRM na tMRM přidáním sekundárních přechodů a trigger parametrů (threshold, entrance delay, trigger delay, trigger window, repeats), akvizice a potvrzení v Qualitative Analysis a tvorba referenční knihovny v Quantitative Analysis.

Použitá instrumentace

• Agilent 6400 Series Triple Quadrupole LC/MS
• Agilent 1200/1260 Series LC: G4226A HiP Sampler, G4220A Binary Pump, G1316C Column Compartment
• ZORBAX Eclipse Plus C18 kolona, 2.1×100 mm, 1.8 µm
• MassHunter Software: Data Acquisition B.06.00+, Qualitative Analysis B.07.00+, Quantitative Analysis B.07.01+

Hlavní výsledky a diskuse

Při aplikaci na pesticidní mix byly úspěšně importovány primární i sekundární přechody, ověřena akvizice MRM dat, automaticky vytvořená dMRM metoda s přizpůsobenými retenčními časy a okny pro optimální dwell time, a nakonec spouštěná tMRM metoda s přesnými trigger parametry. Kontrola v Dynamic MRM Vieweru prokázala dostatečný počet datových bodů přes vrchol a stabilní citlivost. Tvorba referenční knihovny zajišťuje vysokou jistotu identifikace.

Přínosy a praktické využití metody

• Modulární workflow umožňuje rychlou tvorbu a validaci metod pro stovky látek.
• dMRM zvyšuje kapacitu analýzy a udržuje kvalitní dwell time při vyšším počtu přechodů.
• tMRM zajišťuje dodatečné potvrzení identity díky sekundárním přechodům v optimálním čase.
• Standardizovaná databáze usnadňuje sdílení metod a zrychluje zavádění v QA/QC laboratořích.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se rozšíření inteligentních algoritmů pro automatickou optimalizaci retenčních oken a cyklů řízených strojovým učením, integrace s technikami iontové mobilitní spektrometrie (IMS) pro lepší separaci izomerů, podcasting cloudových databází pro sdílení metod v reálném čase a rozšíření aplikace do high-throughput screeningových laboratoří a pokročilé metabolomiky.

Závěr

MassHunter MRM/dMRM/tMRM Database nabízí ucelený postup pro vývoj vysoce selektivních a robustních metod LC-MS/MS. Kombinace MRM, dMRM a tMRM optimalizuje citlivost, udržuje kvalitu dat a umožňuje spolehlivou identifikaci i kvantifikaci v náročných aplikacích.

Reference

• Agilent Technologies, MassHunter MRM/dMRM/tMRM Database Familiarization Guide, G6412-90004, Revision A, 2016