1) Polarita – určitou indikaci polarity obvykle poskytne výrobce GC kolony, uvedená hodnota je normálně určena pomocí Kovatsova retenčního času spolu s McReynoldovými čísly. Obecná rada zní, že polarita stacionární fáze by měla přesně odrážet polaritu sledovaných analytů, takže nepolární fáze, jako je ZB-1 (hodnocení 5 na stupnici polarity), by byla dobrou volbou pro analýzu uhlovodíků, zatímco pro alkoholy se často volí <a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://gcms.cz/products/1582">ZB-Wax</a> (57 na stupnici polarity).2) Selektivita – je řízena různými funkčními skupinami přítomnými v polymerní stacionární fázi, jejímž základem je buď polysiloxan nebo polyethylenglykol. Polysiloxanové fáze budou mít typicky methylové skupiny, fenylové skupiny nebo kyanopropylové skupiny připojené k polysiloxanovým řetězcům, které umožňují vznik celé řady různých interakcí:<ul><li>Metylové skupiny – van der waalsovy or Londonovy síly,</li><li>Fenylové skupiny – pi-pi interakce,</li><li>Kyano skupiny – pi-pi a dipole-dipole interakce.</li></ul>Zvýšení procentuálního zastoupení fenylových nebo kyanopropylových substituentů ve stacionární fázi zvyšuje polaritu. Polyethylenglykolová (PEG) fáze nabízejí místa pro interakce dipól-dipól a vodíkové můstky, PEG fáze jsou typicky jedny z nejpolárnějších dostupných fází.3) Délka – zvětšení délky kolony zvyšuje počet teoretických pater, což napomáhá rozlišení, avšak zvětšující se délka kolony také prodlužuje dobu analýzy. Kolona o délce 30m je obecně dobrým výchozím bodem pro obecný vývoj metod, zatímco 60m kolona se obvykle používá pro analýzu fingerprint složitých směsí. Kolona o délce 15 m se obecně používají, když je požadována rychlá separace méně složitých směsí.4) ID – Volba ID kolony má vliv jak na kapacitu kolony (kolik analytu můžete nastříknout), tak na efektivitu. Čím užší je ID kolony, tím vyšší je účinnost, ale nižší kapacita. Vhodnm výchozím parametrem pro vývoj metody je 0,25 mm ID kolony, který ukazuje dobrý kompromis mezi účinností a kapacitou. Pokud převádíte metodu ze staré plněné GC kolony na kapilární GC kolony, pak se často volí kolony s vnitřním průměrem 0,53 mm kvůli jejich vyšší kapacitě analytu.5) Tloušťka filmu&nbsp; – Tenké filmy poskytují nejvyšší účinnost, ale mají nižší retenci analytu. Silnější film mají vyšší kapacitu, ale při vysokých teplotách vedou k většímu propouštění. Pokud se rozhodnete použít tenký film (0,1 - 0,25 µm) s aktivními analyty, je výhodné vybrat kolonu, která je vysoce deaktivovaná, aby se zabránilo chvostování píku. Takové kolony obecně poskytují nižší propouštění.

Jaké parametry vzít v úvahu při výběru GC kolony pro mou aplikaci?

<h4>Kontrolní seznam před instalací</h4><ul><li>Podle potřeby vyměňte trapy kyslíku, vlhkosti a uhlovodíků.</li><li>Zkontrolujte tlaky v plynových lahvích, abyste se ujistili, že jsou k dispozici dostatečné zásoby nosných, doplňovacích a palivových plynů. Nosné plyny by měly mít nejvyšší čistotu.</li><li>Zajistěte, aby byl injekční port čistý a bez zbytků vzorku, septa nebo kapilárních nečistot.</li><li>Zkontrolujte a podle potřeby vyměňte kritické součásti vstřikovače, jako jsou těsnění, vložky a septa.</li><li>Zkontrolujte a podle potřeby vyměňte těsnění detektoru.</li><li>Pečlivě zkontrolujte vaši kolonu, zda není poškozená nebo zlomená.</li></ul>Poznámka: Je důležité, aby byl kyslík a voda odstraněny z nosného plynu vhodným použitím filtrů a adsorbentů<h4>Instalace injektoru</h4>Poznámka: GC kolony nemají při dodání od výrobce specifický směrový tok. Při prvním použití vaší nové GC kolony se doporučuje vyhradit jeden konkrétní konec kolony pouze pro instalaci injektoru. To je zvláště důležité při práci s aktivními/žíravými nebo kontaminujícími sloučeninami. Pokud jsou tyto sloučeniny běžně vstřikovány do kolony, dojde k degradaci fáze, což povede k vyšší míře bleedingu. Typickým prvním krokem k nápravě (odstranění) bleedingu by bylo seříznout 10 cm od předního (injektorového) konce kolony a podle potřeby nadále ořezávat tento vstupní konec kolony. Pokus o nápravu problémů s bleedingem oříznutím kolony nemusí fungovat, pokud byly oba konce střídavě instalovány na vstupu.<ol><li>Umístěte kapilární matici a objímku na konec injektoru GC kolony tak, aby část kolony vyčnívala. Odřízněte jeden až dva centimetry od vyčnívajícího konce, abyste odstranili kontaminaci objímky, která se mohla dostat do kolony. Zkontrolujte řez pomocí lupy, abyste se ujistili, že byla vytvořena hladká, čistá hrana se čtvercovým řezem - v případě potřeby znovu seřízněte.</li><li>Opatrně zavěste kolonu do GC pece, dávejte pozor, abyste nepoškrábali nebo nepoškodili polyimidový povlak na kapilární trubici. Otáčejte kolonou, abyste se vyhnuli ostrým ohybům kapilární kolony a jakémukoli kontaktu kolony s povrchy pece.</li><li>Vložte kolonu do injektoru přesně ve správné vzdálenosti uvedené v návodu k přístroji. Utáhněte matici objímky prstem a poté o 1/2 otáčky klíčem. Pokud lze sloupek stále posunout, utáhněte ještě o 1/4 otáčky, dokud nebude sloupek zajištěn.</li><li>Upravte nosný plyn tak, abyste dosáhli průtoku uvedeného na zkušebním chromatogramu.</li></ol>

Instalace kolony pro plynovou chromatografii (GC) - Injektor

V tomto technickém tipu vám přinášíme několik užitečných doporučení pro práci s plynovou chromatografií (GC), konkrétně se zaměřením na instalaci kolon – od kondicionování, přes testování instalace až po kontrolu těsnosti. Správná instalace kolony a její bezchybný provoz jsou klíčové pro přesnou a spolehlivou analýzu. Podívejme se na hlavní osvědčené postupy:<h3>Kondicionování kolony</h3><ul><li>Před zahájením analýz nechte dostatečně dlouho protékat nosný plyn kolonou, aby došlo k odstranění kyslíku ze systému.</li><li>Poté zvyšte teplotu kolony na maximální izotermickou provozní teplotu uvedenou ve zkušebním protokolu ke konkrétní GC koloně. Tuto teplotu udržujte, dokud se nezíská stabilní základní linie. Doba kondicionování závisí na chemické povaze stacionární fáze a její tloušťce – silnější filmy se stabilizují déle. Pro minimalizaci prostojů lze kolony kondicionovat přes noc při této maximální izotermické teplotě.</li></ul><h3>Testování instalace</h3><ul><li>Pro ověření správné instalace vstříkněte nezadržovaný analyt, například methan (při detekci FID), a změřte dobu mrtvého objemu a lineární rychlost plynu při požadované teplotě. Tlak nosného plynu upravte dle požadovaného průtoku a zvoleného typu plynu.</li><li>Nezadržovaný pík musí mít ideální (symetrický) tvar. Pokud tomu tak není, je instalace vadná a je třeba ji zopakovat.</li></ul><h3>Kontrola těsnosti</h3><ul><li>Pro detekci netěsností použijte teploměr s termočlánkem – je vysoce citlivý na vodík, helium i dusík a zároveň nezpůsobuje kontaminaci systému. Kapalné indikátory úniku nejsou pro kapilární kolony vhodné – hrozí riziko nasátí kapaliny do kolony nebo armatur, což může vést ke kontaminaci.</li><li>Únik nosného plynu způsobí změnu vodivosti v okolí termočlánku, což se projeví jako kolísání naměřené teploty – to signalizuje možnou netěsnost. Tato metoda je bezkontaktní a minimalizuje riziko kontaminace kolony.</li></ul>Poznámka: Pokud používáte ferule z materiálu Vespel®, může po zahřátí dojít k jejich deformaci a následnému úniku. Po zahřátí je proto nutné armatury znovu dotáhnout a pečlivě zkontrolovat případné netěsnosti.Dodržování těchto doporučení pomáhá zajistit optimální výkon kolon, prodloužit jejich životnost a minimalizovat prostoje způsobené údržbou systému.

Plynová chromatografie (GC) – kondicionování, testování a kontrola kolon

Webináře

Aplikace

Akademie

Osobnosti

Plasty

Životní prostředí

Potraviny

Vody

Zdraví

Přednáška

Vědecký článek

Rozhovor

Toxikologie

Popularizace

Věda a výzkum

Software

Covid-19

Kariéra

Článek

Laboratoře

Různé

Produkt

Video

Poster

Nejbližší akce

Typ novinky

Zaměření

Společnost Phenomenex je celosvětovým technologickým lídrem, který se zabývá vývojem nových řešení v oblasti analytické chemie, jež řeší požadavky analytiků na separace a purifikace v průmyslových, vládních a akademických laboratořích.

Phenomenex

Shimadzu at ISC 2026

DataApex at ISC 2026

Představení přístroje Revo od společnosti Nicoya

ICP-MS for Hybrid Photoelectrode Characterization

Modern Methods for Faster Microbial Analysis

Addressing LC Method Optimization - Scaling For Efficiency, Throughput And Reproducibility