Iontově výměnná chromatografie (IEX) je významná separační technika, která umožňuje dělení ionizovatelných látek podle jejich náboje. Díky kombinaci svých vlastností představuje účinnou chromatografickou metodu, protože:<ul><li>umožňuje zpracování velkých objemů vzorku,</li><li>má široké možnosti využití, zejména při separaci enzymů a proteinů,</li><li>poskytuje vysokou rozlišovací schopnost,</li><li>umožňuje snadnou automatizaci,</li><li>lze ji snadno škálovat,</li><li>kombinuje dobré separační vlastnosti s přijatelnými náklady.</li></ul><h3>Princip iontově výměnné chromatografie</h3>Princip iontově výměnné chromatografie je založen na reverzibilní výměně iontů mezi mobilní fází, tedy kapalným roztokem obsahujícím vzorek, a stacionární fází tvořenou pevným nosičem s nabitými funkčními skupinami. Podle typu náboje stacionární fáze rozlišujeme:<ul><li>Katexovou chromatografii (výměna kationtů): stacionární fáze obsahuje záporně nabité skupiny, které přitahují a vážou kladně nabité ionty (kationty).</li><li>Anexovou chromatografii (výměna aniontů): stacionární fáze obsahuje kladně nabité skupiny, které přitahují a vážou záporně nabité ionty (anionty).</li></ul>Po nanesení vzorku na kolonu soutěží ionty obsažené ve vzorku s protiionty vázanými na stacionární fázi o vazebná místa. Síla této interakce závisí na několika faktorech, mimo jiné na hustotě náboje a velikosti jednotlivých iontů. Ionty s vyšší hustotou náboje se obvykle vážou ke stacionární fázi silněji než ionty s nižší hustotou náboje.Tato technika se využívá v různých oblastech farmaceutického průmyslu díky své schopnosti separovat různé typy požadovaných nabitých molekul. Široké uplatnění nachází při purifikaci enzymů, aminokyselin, proteinů, protilátek, jednodušších sacharidů, organických sloučenin a nukleových kyselin.<blockquote>Prozkoumejte <a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://www.phenomenex.com/techniques/hplc-ion-exchange">techniku iontově výměnné chromatografie</a> a dosáhněte účinné separace v chromatografických aplikacích.</blockquote><h3>Postup iontově výměnné chromatografie – jak funguje?</h3>Proces iontově výměnné chromatografie lze rozdělit do několika fází:<ul><li>Ekvilibrace: Kolona se ekvilibruje pufrem s pH vhodným pro optimální vazbu cílových analytů.</li><li>Nanesení vzorku: Vzorek se nanese na kolonu, kde jeho nabité složky interagují s opačně nabitými místy stacionární fáze. Tyto interakce ovlivňují míru retence jednotlivých molekul.</li><li>Promývání: Kolona se promyje pufrem, aby se odstranily nevázané nebo slabě vázané nečistoty.</li><li>Eluce: Navázané molekuly se eluují postupným zvyšováním koncentrace soli nebo změnou pH. Tím se mění náboj analytů a usnadňuje jejich uvolnění ze stacionární fáze.</li><li>Sběr a analýza: Eluované frakce se shromažďují a následně analyzují například pomocí UV spektroskopie nebo hmotnostní spektrometrie za účelem identifikace a kvantifikace separovaných složek.</li></ul><h3>Aplikace iontově výměnné chromatografie</h3><ul><li>Purifikace proteinů a enzymů: Široce se využívá k izolaci a purifikaci proteinů, enzymů a dalších biomolekul na základě jejich náboje.</li><li>Separace nukleových kyselin: Využívá se k separaci a purifikaci DNA, RNA a oligonukleotidů.</li><li>Analýza aminokyselin: Uplatňuje se při analýze a kvantifikaci aminokyselin v komplexních vzorcích.</li><li>Farmaceutický průmysl: Využívá se při formulaci léčiv, kontrole kvality a purifikaci biofarmaceutik.</li><li>Úprava vody: Slouží k odstraňování nežádoucích iontů z vody, například iontů vápníku a hořčíku způsobujících její tvrdost.</li><li>Potravinářský a nápojový průmysl: Využívá se při čištění potravinářských aditiv, odstraňování kontaminantů a zlepšování kvality produktů.</li><li>Analýza metabolitů: Usnadňuje identifikaci a separaci malých nabitých metabolitů.</li></ul><h3>Hlavní výhody iontově výměnné chromatografie</h3><ul><li>Jednou z hlavních výhod je schopnost separovat molekuly podle jejich náboje, který představuje základní vlastnost mnoha biomolekul, jako jsou proteiny, peptidy a nukleové kyseliny.</li><li>Další významnou výhodou je její univerzálnost. Iontově výměnnou chromatografii lze provozovat za různých podmínek, včetně změn pH, koncentrace solí a teploty, což umožňuje separaci širokého spektra molekul. Tato flexibilita rozšiřuje možnosti jejího využití v různých oblastech výzkumu, od farmacie až po environmentální analýzu.</li><li>Iontově výměnná chromatografie navíc nabízí vysoké rozlišení a dobrou reprodukovatelnost, což umožňuje purifikovat požadované molekuly s vysokou výtěžností. Metodu lze rovněž snadno škálovat, takže je vhodná jak pro laboratorní použití v malém měřítku, tak pro průmyslové aplikace ve velkém měřítku.</li></ul><h3>Omezení iontově výměnné chromatografie</h3><ul><li>Jedním z významných omezení je její citlivost na pH a iontovou sílu. pH mobilní fáze musí být pečlivě kontrolováno, protože jeho změny mohou ovlivnit ionizační stav analytů i stacionární fáze, což může vést k neúplné separaci nebo nízkému rozlišení. Rovněž je nutné optimalizovat iontovou sílu elučního pufru. Pro eluci silně vázaných analytů jsou často zapotřebí vysoké koncentrace solí, což může být problematické u citlivých sloučenin, které mohou za těchto podmínek precipitovat nebo ztrácet svou aktivitu.</li><li>Dalším omezením je možnost degradace vzorku. Vysoké koncentrace solí a extrémní hodnoty pH potřebné pro eluci mohou vést k denaturaci proteinů nebo destabilizaci citlivých biomolekul. Kapacita iontoměničových kolon je navíc omezená, a proto je nutné pečlivě řídit množství nanášeného vzorku. Přetížení kolony může způsobit zhoršení separace a snížení rozlišení.</li><li>Iontově výměnná chromatografie může být také poměrně časově náročná, protože eluce často využívá postupné gradienty koncentrace solí nebo pH, které mohou prodlužovat dobu analýzy. Metoda navíc není vhodná pro všechny typy analytů, zejména pro neiontové sloučeniny nebo látky, které za použitých podmínek nevykazují dostatečné rozdíly v náboji.</li></ul>

Principy iontově výměnné chromatografie: Komplexní průvodce

Zveme Vás na praktický kurz Škola SW Chromeleon 7, jehož cílem je seznámit účastníky s praktickým využitím <a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://labrulez.com/cs-cz/all/products/76">SW Chromeleon 7 </a>při využití v LC/GC/IC/MS. Kurz je určen pro začátečníky i uživatele softwaru Chromeleon (bude demonstrován na verzi 7.3.2, ale je určen i pro účastníky s jinou verzí).<ul><li>📅Datum: 21. 10. + 22. 10. + 23. 10. 2026</li><li>🕘Čas: 09:00 - 12:00</li><li>📍Místo: online</li></ul><blockquote>👉<a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://forms.cloud.microsoft/Pages/ResponsePage.aspx?id=aR-wpy9pT0iMxW5H7RJK8WO2jiQLb7NOszjVkgYyezJUMlE5QTkxRjFBNjBRU1QxUUlXQ0JZRDRPOC4u">Registrace</a>Kapacita je omezená, žádáme Vás o registraci</blockquote><h4>Cena kurzu</h4><ul><li>Den 1 + Den 2 -&gt; 5300 Kč bez DPH/osoba</li><li>Den 1 + Den 2 + Den 3 -&gt; 7400 Kč bez DPH/osoba</li></ul><h4>Lektoři:</h4><ul><li>Ing. Radim Kruliš (HPLC, IC, LC-MS)</li><li>Mgr. Petr Šulc (HPLC, LC-MS)</li><li>Ing. Petra Dinisová (Aplikační specialista)</li></ul><h3>Program</h3><h5>1. den</h5><ul><li>Intro, CM Architecture, Config, Admin Console</li><li>CM Console, Instrument Control, ePanels, Commands</li><li>CM Console, Data Category, Sequence editor, Instrument Audit Trail</li><li>CM Studio, Instrument Method Editor (+Script editor)</li></ul><h5>2.den</h5><ul><li>CM Studio, Data Processing, Data Audit Trail</li><li>CM Studio, Data Processing, Report Designer, Data Export</li></ul><h5>3.den</h5><ul><li>Úvod do zpracování LCMS a GCMS dat</li><li>CM Studio, Mass spektra, MS autofilters, MS components</li><li>Diskuze, vyhodnocení, certifikáty, ukončení</li></ul>Součástí každého dne bude i prostor pro diskuzi, kurzy však nejsou zaměřeny na řešení individuálních problémů. V případě potřeby takovéhoto řešení či jakýchkoli jiných dotazů nás neváhejte kontaktovat na eliasova@pragolab.cz nebo +420 771 137 630.Těšíme se na Vás.Váš tým Pragolab s.r.o.

Pozvánka na online praktický kurz Škola SW Chromeleon 7 při využití v LC/IC/GC/MS

Co mají společného vysoce účinné separace a větší udržitelnost v laboratoři? SFC dokáže obojí propojit.Srdečně vás zveme na zajímavý webinář:<h5>Shimadzu SFC Solutions for You</h5>📅 Čtvrtek 17. září 2026⏰ 10:00–12:00 CEST🗣️ Jazyk webináře: angličtina<blockquote>👉 <a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://register.gotowebinar.com/register/6615399082225001567">Registrujte se zde</a></blockquote>Zjistěte, jak může superkritická fluidní chromatografie (SFC) rozšířit vaše analytické možnosti. Naši odborníci představí:<ul><li>základy SFC a její analytické výhody</li><li>aktuální hardwarová a softwarová řešení Shimadzu</li><li>praktické aplikace a reálné příklady výkonnosti</li><li>ozhovor se švýcarským uživatelem SFC, společností SpiroChem AG</li><li>závěrečnou živou diskusi s možností klást dotazy</li></ul>Ať už SFC ve své laboratoři již používáte, nebo se s touto technologií teprve seznamujete, webinář nabídne zajímavé informace, praktické zkušenosti i prostor pro vaše dotazy.<h4>Program</h4><h5>10:00 Přivítání, představení přednášejících a programu</h5><h5>10:05 Teorie SFC a princip separace</h5><h5>10:20 Analytické výhody SFC</h5><h5>10:40 Hardwarová a softwarová konfigurace Shimadzu pro SFC</h5><h5>11:00 Typické aplikace SFC</h5><h5>11:20 Rozhovor se švýcarským uživatelem SFC ze společnosti SpiroChem AG</h5><h5>11:40 Dotazy a odpovědi</h5><blockquote>Přednášející: Joël Fricker (Business Development Leader, Shimadzu Schweiz GmbH)Joël Fricker působí jako Business Development Leader a Sales Manager ve společnosti Shimadzu Schweiz GmbH.Přednášející: Philipp Jochems (Product Specialist HPLC, Shimadzu Europa GmbH)Philipp Jochems působí jako produktový specialista pro HPLC ve společnosti Shimadzu Europa GmbH.Přednášející: Dr. Samantha Wörner (Application Specialist LC/LCMS, Shimadzu Schweiz GmbH)Dr. Samantha Wörner působí jako aplikační specialistka pro LC/LCMS ve společnosti Shimadzu Schweiz GmbH.</blockquote>

Pozvánka na Shimadzu webinář o superkritické fluidní chromatografii (SFC)

Webináře

Akademie

Software

Video

Článek

Nejbližší akce

Společnost Phenomenex je celosvětovým technologickým lídrem, který se zabývá vývojem nových řešení v oblasti analytické chemie, jež řeší požadavky analytiků na separace a purifikace v průmyslových, vládních a akademických laboratořích.

Phenomenex

Jsme jedním z lídrů na českém a slovenském trhu v oblasti laboratorních zařízení a svým zákazníkům přinášíme špičkové přístroje z oboru analytické chemie a fyzikálních měření více než 25 let.

Pragolab

Naším posláním je šířit informace o produktech firmy Shimadzu v oblasti instrumentálních analytických přístrojů, přístrojů pro testování materiálů a speciálních přístrojů pro life science, jejich prodej a následně - instalace, zaškolení, záruční a pozáruční servis, ověřování a validace a aplikační podpora.

SHIMADZU Handels GmbH - organizační složka

Waters AccQ·Tag Ultra Chemistry kit

Kompletní sada pro analýzu a stanovení aminokyselin v různorodých matricích metodou UPLC/UV po jednoduché a rychlé předkolonové derivatizaci AQC (6-aminoquinolyl-N-hydroxysuccinimidyl carbamate) čindlem.

Kvalitativní i kvantitativní analýza aminokyselin je společná mnoha oblastem výzkumu i kontrol kvality výrobních procesů. Robustní a spolehlivé metody jsou tak potřeba při analýzách rozličných matic vzorků – proteinové a peptidové hydrolyzáty, buňěčná kultivační média, potraviny, nápoje a krmiva. Zde všude lze využít AccQ·Tag, který obsahuje derivatizační sadu, standardy a také kolonu a eluenty pro následné chromatografické stanovení.
Předkolonová derivatizace je snadná, rychlá a probíhá činidlem AQC (6-aminoquinolyl-N-hydroxysuccinimidyl carbamate) ve vodném prostředí podle následujícího schématu:
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Waters_Predkolonova_derivatizace_cinidlem_AQC_6_aminoquinolyl_N_hydroxysuccinimidyl_carbamate_ve_vodnem_prostredi_74617df064/Waters-Predkolonova-derivatizace-cinidlem-AQC-(6-aminoquinolyl-N-hydroxysuccinimidyl-carbamate)-ve-vodnem-prostredi.jpg" alt="Waters: Předkolonová derivatizace činidlem AQC (6-aminoquinolyl-N-hydroxysuccinimidyl carbamate) ve vodném prostředí"/>
<ul>
<li>Primární a sekundární amino skupiny reagují velmi rychle s AQC za vzniku derivátů viditelných pro fluorescenční i UV detekci</li>
<li>Nadbytek činidla reaguje s vodou, ale výrazně pomaleji než s aminokyselinami</li>
<li>Vedlejší produkty jsou dobře chromatograficky separovány a neruší analýzu aminokyselin</li>
<li>Derivatizace probíhá přímo ve vialkách, deriváty jsou stabilní a umožňují tak případné retestování vzorku</li>
</ul>
Derivatizované aminokyseliny jsou separovány na koloně <a href="https://lcms.cz/library?search=AccQ%20Ultra%20C18&amp;mainauthorItems=5">AccQ·Tag Ultra C18</a> 2.1 x 100 mm s 1.7 µm hybridními BEH částicemi.
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Separace_derivatizovanych_aminokysel_na_kolone_Acc_Q_Tag_Ultra_C18_2_1_x_100_mm_s_1_7_m_hybridnimi_BEH_casticemi_ef2463364c/Separace-derivatizovanych-aminokysel-na-kolone-AccQTag-Ultra-C18-2.1-x-100-mm-s-1.7-m-hybridnimi-BEH-casticemi.jpg" alt="Waters: Separace derivatizovaných aminokysel na koloně AccQ·Tag Ultra C18 2.1 x 100 mm s 1.7 µm"/>
V případě nutnosti vysoké propustnosti vzorků je sada upravena pro automatizovanou derivatizaci a přípravu vzorků na platformách
<ul>
<li><a href="https://www.andrewalliance.com/">Andrew Alliance</a> a jeho <a href="https://lcms.cz/library?search=Andrew&amp;mainauthorItems=5">aplikační použití</a></li>
<li>Hamilton</li>
<li>Tecan</li>
</ul>
<img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Water_Andrew_Alliance_robot_pro_pipetovani_33534c49c3/Water-Andrew-Alliance-robot-pro-pipetovani.jpg" alt="Water - Andrew Alliance robot pro pipetování.jpg"/>
Další informace naleznete na webu <a href="https://www.waters.com/waters/Amino-Acid-Analysis-Standards-%26-Kits/nav.htm?cid=134635960&amp;alias=Alias_aaa_CHEMISTRY&amp;locale=%22e=en_GD%22">Waters Corporation</a>.

Produkty od Waters - strana 1

Mohlo by Vás zajímat

Pozvánka na Shimadzu webinář o superkritické fluidní chromatografii (SFC)

Principy iontově výměnné chromatografie: Komplexní průvodce

Pozvánka na online praktický kurz Škola SW Chromeleon 7 při využití v LC/IC/GC/MS