Porozumění výsledným datům vysokoúčinné kapalinové chromatografie (HPLC) umožňuje převést nezpracovaný signál detektoru na spolehlivé závěry o čistotě, identitě a obsahu analytů. Pokud víte, jak správně interpretovat píky a základní linii HPLC chromatogramu, můžete rychle odhalit případné problémy, ověřit správnou funkci metody a získat podklady pro dokumentaci splňující regulační požadavky.<h3>Co je HPLC chromatogram?</h3>HPLC chromatogram je grafický záznam závislosti signálu detektoru na čase, který ukazuje, jak jednotlivé složky vzorku procházejí kolonou a postupně se dostávají k detektoru. Každý pík odpovídá určité složce vzorku, přičemž jeho poloha na časové ose určuje retenční čas a velikost píku souvisí s koncentrací dané látky.V rutinní analýze se retenční čas využívá k potvrzení identity analytu, zatímco plocha nebo výška píku slouží ke kvantifikaci. Schopnost správně interpretovat HPLC chromatogram je proto nezbytnou součástí každodenní analytické praxe.<h3>Proč je důležité správně interpretovat HPLC chromatogramy?</h3>Správná interpretace výsledků HPLC je důležitá, protože retenční čas a odezva píku patří mezi klíčové parametry pro separaci, identifikaci a kvantifikaci látek v komplexních směsích. Nesprávné vyhodnocení základní linie nebo tvaru píku může ovlivnit jeho integraci, a tím i přesnost stanovení obsahu a kvantifikace nečistot.Správná interpretace <a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://www.phenomenex.com/resources/knowledge-center/hplc-knowledge-center/what-are-chromatograms">chromatogramu</a> rovněž pomáhá včas odhalit změny v chování metody, udržet parametry testu vhodnosti systému v požadovaných mezích a zabránit nákladnému opakování analýz nebo zamítnutí šarží.<h3>Základní části HPLC chromatogramu</h3>Než začnete chromatogram interpretovat, je třeba znát jeho základní části. Každý z jeho prvků poskytuje specifické informace o průběhu separace a analytech přítomných ve vzorku.<h4>Základní linie</h4>Základní linie představuje signál detektoru v době, kdy z kolony neeluuje žádný analyt. Stabilní a rovná základní linie je nezbytná pro spolehlivou integraci a kvantifikaci. Podrobnější informace o šumu a driftu základní linie jsou uvedeny níže v části věnované řešení problémů. Obecně platí, že jakákoli nestabilita základní linie může ovlivnit spolehlivost integrace a porovnávání píků.<h4>Píky</h4>Píky představují eluované analyty a v ideálním případě mají přibližně Gaussovský tvar vystupující nad základní linii. Symetrické a dobře oddělené píky se snadněji integrují a jejich odezva je při kvantitativním stanovení spolehlivější.<h4>Retenční čas</h4>Retenční čas tR je doba od nástřiku vzorku do dosažení maxima píku a vyjadřuje, jak dlouho analyt prochází kolonou v porovnání s mobilní fází. Čelo rozpouštědla nebo pík nezadržované složky odpovídá mrtvému retenčnímu času t0, tedy době průchodu nezadržované složky chromatografickým systémem.<h4>Plocha a výška píku</h4>Plocha píku je pro kvantitativní analýzu obecně spolehlivějším parametrem než jeho výška, protože lépe odpovídá celkovému množství analytu, které prošlo detektorem. U validovaných metod se plocha píku, případně v některých případech jeho výška, vztahuje ke koncentraci prostřednictvím kalibračních křivek a interních standardů.<h4>Rozlišení</h4>Rozlišení charakterizuje míru separace dvou píků a závisí na separační účinnosti, selektivitě a retenci. Dostatečné rozlišení znamená, že se píky významně nepřekrývají, což zvyšuje spolehlivost identifikace a kvantifikace zejména u blízko eluujících nečistot.<h4>Mrtvý retenční čas (t₀)/mrtvý čas</h4>Mrtvý retenční čas t0, označovaný také jako tM, je doba potřebná k průchodu nezadržované složky nebo čela mobilní fáze kolonou až k detektoru. Hodnota tM slouží jako referenční údaj pro výpočet retenčního faktoru a pro posouzení intenzity interakcí analytu se stacionární fází.<h3>Postup při interpretaci HPLC chromatogramu</h3>Vyhodnocování chromatografických dat vyžaduje systematický přístup, který umožní zachytit všechny důležité informace. Následující postup pomáhá spolehlivě a přesně posoudit výsledky chromatografické analýzy.<h4>Zkontrolujte stabilitu základní linie</h4>Nejprve ověřte, zda je základní linie stabilní, nebo zda vykazuje náhodný šum či pozvolný drift v průběhu analýzy. Výrazný drift nebo vysoká úroveň šumu mohou signalizovat problémy s regulací teploty, kvalitou rozpouštědel nebo stabilitou detektoru. Tyto problémy je nutné vyřešit dříve, než lze výsledky kvantifikace považovat za spolehlivé.<h4>Vyhledejte a spočítejte píky</h4>Následně projděte chromatogram, identifikujte všechny zřetelné píky vystupující nad základní linii a porovnejte jejich relativní velikost. Porovnání počtu nalezených píků s očekávaným počtem podle standardů nebo složení vzorku pomáhá odhalit koeluci, neočekávané píky nebo chybějící analyty.<h4>Určete retenční čas</h4>Pro každý pík stanovte retenční čas tR a zaznamenejte jej spolu s hodnotami známých standardů nebo údaji z testu vhodnosti systému. Stabilní hodnoty tR v rámci definovaných tolerančních mezí podporují správnou identifikaci analytů, zatímco výraznější posuny mohou signalizovat změny teploty, složení mobilní fáze nebo průtoku.<h4>Vypočítejte kapacitní faktor (k) z tM a tR</h4>Kapacitní faktor k (nebo také retenční faktor) vyjadřuje, jak dlouho je analyt zadržován v porovnání s nezadržovanou složkou, a lze jej vypočítat z chromatogramu. Z mrtvého retenčního času tM a retenčního času analytu tR se vypočítá podle vztahu:k = (tR – tM) / tMKapacitní faktor umožňuje posoudit, zda jsou píky eluovány příliš blízko mrtvému retenčnímu času tM, nebo zda analyt dostatečně interaguje se stacionární fází. Tento údaj je užitečný také při optimalizaci chromatografické metody.<h4>Vyhodnoťte plochu píku pro kvantifikaci</h4>Pro kvantitativní stanovení integrujte jednotlivé píky a získané plochy porovnejte s kalibračními standardy nebo interními standardy, na jejichž základě lze vypočítat koncentraci analytu. Spolehlivé stanovení plochy píku závisí na správném určení základní linie a stabilní odezvě detektoru. Před konečným vyhodnocením proto vždy zkontrolujte kvalitu základní linie.<h4>Vyhodnoťte&nbsp;tvar píků a rozlišení</h4>Zkontrolujte, zda jsou píky symetrické, nebo zda vykazují chvostování, frontování či rozšiřování, a posuďte rozlišení mezi sousedními píky. Změny tvaru píků v chromatogramu mohou upozornit na mimokolonové efekty, problémy s náplní kolony nebo interakce analytu s aktivními místy stacionární fáze.Pokud problémy přetrvávají, zkontrolujte výběr <a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://labrulez.com/cs-cz/lcms/products?category=48&amp;manufacturerItems=50">HPLC kolony</a>, přípravu vzorku a nastavení gradientové nebo izokratické eluce.<h3>Běžné problémy v HPLC chromatogramech a jejich identifikace</h3>I dobře vyvinuté chromatografické metody mohou v průběhu času vykazovat zhoršení a na chromatogramu se mohou objevit charakteristické změny signalizující systémové nebo chemické problémy. Rozpoznání těchto změn tvaru píků a základní linie je prvním krokem při řešení problémů.<h4>Chvostování píku</h4><a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://www.phenomenex.com/resources/knowledge-center/hplc-knowledge-center/how-to-reduce-peak-tailing-in-hplc">Chvostování píku</a> se projevuje prodloužením pravé, sestupné části píku do dlouhého chvostu namísto symetrického návratu k základní linii. Sestupná hrana píku klesá pozvolna a pík je asymetrický, což komplikuje správné určení integračních mezí a může signalizovat disperzi nebo sekundární interakce analytu.Chvostování lze omezit minimalizací mimokolonového objemu a kontrolou náplně kolony a aktivních míst.<h4>Frontování píku</h4><a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://www.phenomenex.com/resources/knowledge-center/hplc-knowledge-center/peak-fronting">Frontování píku</a> se projevuje rozšířením přední, vzestupné části píku a posunem jeho maxima vzhledem k celkovému profilu píku. Pík je asymetrický a jeho přední část se může výrazněji překrývat se sousedními píky, což může zkreslit hodnocení čistoty zejména u rychle eluujících složek.Zvažte snížení množství dávkovaného vzorku nebo objemu nástřiku a přizpůsobení eluční síly rozpouštědla vzorku mobilní fázi. Pokud frontování přetrvává, využijte materiály Phenomenex věnované <a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://www.phenomenex.com/resources/knowledge-center/gc-knowledge-center/peak-shape-problems-tailing-peaks">problémům s tvarem píků</a>.<h4>Šum a drift základní linie</h4>Šum základní linie se projevuje jako drobné, rychlé výkyvy signálu, které znesnadňují detekci píků s nízkou intenzitou. Drift základní linie se naopak projevuje jejím pozvolným vzestupem nebo poklesem v průběhu analýzy. Základní linie tak již není stabilní, což může způsobit zdánlivé změny výšky píků a ovlivnit umístění základní linie při integraci.Ke snížení šumu a driftu mohou přispět jednoduchá opatření, jako je účinnější odplynění rozpouštědel, stabilizace teploty a vyčištění průtokové cely detektoru.<h4>Koeluce</h4>Koeluci lze rozpoznat podle toho, že se dva píky zcela neoddělí a místo samostatných píků vytvářejí rameno nebo splývají v jeden pík. Může se objevit jeden pík s plochým vrcholem nebo zřetelným zlomem v místě překryvu dvou složek a údolí mezi píky neklesá k základní linii. To komplikuje přiřazení píků jednotlivým blízko eluujícím nečistotám.Koeluci lze omezit změnou selektivity, například úpravou složení mobilní fáze, gradientového profilu nebo typu stacionární fáze.<h4>Široké píky</h4>Široké píky mají ve srovnání s ostrými píky o podobné ploše výrazně širší základnu a nižší výšku. Na časové ose zaujímají delší časový interval a jejich obě strany mají pozvolnější sklon. To svědčí o rozšiřování chromatografických zón, které snižuje rozlišení a znesnadňuje rozpoznání méně výrazných ramen píků.Zúžení širokých píků obvykle vyžaduje snížení mimokolonových objemů a ověření funkce kolony a vhodnosti velikosti částic stacionární fáze.<h4>Posuny retenčních časů</h4>Posun retenčních časů se projevuje tím, že se všechny píky v porovnání s předchozími analýzami objevují dříve nebo později, zatímco jejich tvar zůstává podobný. Při překrytí chromatogramů jsou patrné shodné posuny polohy píků na časové ose, často v řádu několika procent. Tyto posuny signalizují změny chromatografických podmínek, například teploty nebo složení mobilní fáze, které je nutné pečlivě sledovat.Při řešení posunů retenčních časů je nejprve nutné stabilizovat teplotu a ověřit složení mobilní fáze a nastavení průtoku při jednotlivých analýzách.<h3>Tipy pro správnou interpretaci HPLC chromatogramů</h3>Pro přesnou interpretaci HPLC chromatogramů udržujte stabilní teplotu, používejte dobře odplyněné mobilní fáze a udržujte průtokové cely detektorů a optické součásti čisté. Pravidelně kontrolujte hodnoty kapacitního faktoru a selektivity vzhledem k očekávaným hodnotám metody a před přijetím výsledků ověřte, zda je u kritických párů píků dosaženo dostatečného rozlišení.Pokud dochází k posunům retenčních časů nebo ke zhoršování tvaru píků, porovnejte vývoj <a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://www.phenomenex.com/resources/knowledge-center/gc-knowledge-center/understanding-retention-time">retenčních časů</a> se záznamy o údržbě systému, abyste mohli případné problémy včas odstranit.<h3>Často kladené otázky k interpretaci HPLC chromatogramů</h3><h4>Jak se z chromatogramu vypočítá kapacitní faktor (k)?</h4>Kapacitní faktor k se vypočítá z retenčního času analytu tR a mrtvého retenčního času tM, který se stanoví pomocí nezadržované složky:k = (tR – tM) / tMVyšší hodnoty k znamenají silnější interakci analytu se stacionární fází a delší retenci.<h4>Jak se z chromatografických dat vypočítá selektivita (α)?</h4>Selektivita α vyjadřuje rozdíl v retenci dvou složek a je definována jako poměr jejich kapacitních faktorů:α = k2 / k1kde k2 &gt; k1. Hodnoty α vyšší než 1,2 naznačují příznivější podmínky pro separaci obou složek. S rostoucí hodnotou α se zvyšuje selektivita jejich vzájemného oddělení.<h4>Co vyjadřuje plocha píku v HPLC?</h4>Plocha píku odpovídá celkovému množství analytu, které dosáhne detektoru, a pro kvantitativní stanovení je obecně spolehlivějším parametrem než výška píku. Pomocí kalibračních křivek se stanoví vztah mezi plochou píku a koncentrací analytu. Kalibrační křivky lze spolehlivě používat pouze tehdy, pokud zůstává základní linie i odezva detektoru v průběhu všech nástřiků stabilní.<h4>Jak se retenční čas používá při HPLC analýze?</h4>Retenční čas se využívá jako kvalitativní parametr, protože za konstantních chromatografických podmínek jednotlivé sloučeniny eluují v charakteristických časech. Při rutinních analýzách se retenční časy píků ve vzorku porovnávají s retenčními časy standardů za účelem potvrzení identity analytů, zatímco plocha nebo výška píku se využívá ke stanovení jejich koncentrace.

Jak číst HPLC chromatogram: Podrobný průvodce interpretací výsledků

Nenechte si ujít český webinář - Nové plynové chromatografy <a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://labrulez.com/cs-cz/all/products/2421">Agilent 8890B</a> a <a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://labrulez.com/cs-cz/all/products/2420">Agilent 8860B</a> a získejte více informací o druhé generaci plynových chromatografů modelové řady 88. Nová generace plynových chromatografů Agilent 8890B a 8860B staví na základech předchozí úspěšné řady „A“ a přináší modernizaci zaměřenou na vyšší propustnost vzorků, pokročilejší automatizaci a snazší údržbu...a mnoho dalšího.&nbsp;<h5>Webinář: Nové plynové chromatografy Agilent 8890B a Agilent 8860B</h5><ul><li>čtvrtek 12. listopadu 2026</li><li>10:00 - 10:45 hod</li></ul><blockquote>👉<a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://events.teams.microsoft.com/event/1097f417-c243-433f-88ed-840e3f285a24@31139e4d-0687-4dc9-ada3-e46652ffbd94">Registrujte se na webinář pomocí tohoto odkazu</a></blockquote><h5>Abstrakt&nbsp;</h5>Plynový chromatograf Agilent 8890B představuje výrazný krok vpřed v oblasti inteligentní diagnostiky, automatizované údržby, uživatelského komfortu a produktivity laboratoře. Vylepšený systém GC Assist nabízí uživatelsky přívětivé prostředí pro průběžné sledování stavu přístroje, diagnostiku a efektivní údržbu. Video návody k údržbě, interaktivní průvodci a další chytré funkce poskytují uživateli praktickou podporu při každodenní práci a pomáhají zajistit optimální stav přístroje. K vyšší produktivitě přispívá také velmi rychlé chlazení pece a flexibilní konfigurace s možností instalace až pěti detektorů.Nová platforma GC Assist posouvá na vyšší úroveň i rutinní plynový chromatograf Agilent 8860B. Uživatelům poskytuje přehled o stavu přístroje a umožňuje jeho vzdálené monitorování, čímž usnadňuje každodenní provoz a přispívá k vyšší spolehlivosti a konzistentní kvalitě výsledků. K efektivnějšímu využití přístroje a zvýšení produktivity laboratoře přispívá také možnost duálního simultánního nástřiku.<blockquote>Přednášející: Daniel Sander (Produktový specialista, Altium Czech Republic)</blockquote><h3>Více informací o nových plynových chromatografech Agilent 8860B a 8890B naleznete také v <a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://labrulez.com/cs-cz/gcms/library?from=2026&amp;instrumentationItems=1&amp;mainauthorItems=10&amp;to=2026">knihovně LabRulezGCMS</a></h3><h4>Agilent 8860B GC</h4><a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://labrulez.com/pdf/br_8860b_gc_5994_9206en_agilent_7b7b766cd2.pdf">Operational efficiency for your GC and GC/MS labs with the Agilent 8860B gas chromatography system</a><ul><li>Brožury a specifikace</li></ul><a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://labrulez.com/pdf/ds_8860_gas_chromatograph_5994_9066en_agilent_f4d445178f.pdf">Agilent 8860B Gas Chromatograph</a><ul><li>Brožury a specifikace</li></ul><a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://labrulez.com/pdf/Agilent_GC_8860_Site_Preparation_Checklist_4005a2d93b.pdf">8860A/B Gas Chromatograph Site Preparation Checklist</a><ul><li>Brožury a specifikace</li></ul><a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://labrulez.com/pdf/an_trace_impurity_aromatic_solvents_analysis_astm_d7504_8860_gc_5994_9316en_agilent_c9fa6868e6.pdf">Analysis of Trace Impurities in Monocyclic Aromatic Solvents Following ASTM D7504</a><ul><li>Aplikace</li></ul><h4>Agilent 8890B GC</h4><a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://labrulez.com/pdf/an_trace_analysis_m_xylene_high_purity_p_xylene_5994_9329en_agilent_508bcfb48c.pdf">Routine Trace‑Level Analysis of m‑Xylene in High‑Purity p‑Xylene</a><ul><li>Aplikace</li></ul><a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://labrulez.com/pdf/br_8890b_gc_5994_9205en_agilent_fb5db29527.pdf">Operational efficiency for your GC and GC/MS labs with the Agilent 8890B gas chromatography system</a><ul><li>Brožury a specifikace</li></ul><a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://labrulez.com/pdf/ds_8890_gas_chromatograph_5994_9064en_agilent_94b0175782.pdf">Agilent 8890B Gas Chromatograph</a><ul><li>Brožury a specifikace</li></ul><a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://labrulez.com/pdf/8890_GC_site_preparation_checklist_D0007040_en_agilent_04200a868a.pdf">8890A/B Gas Chromatograph Site Preparation Checklist</a><ul><li>Brožury a specifikace</li></ul><a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://labrulez.com/pdf/an_residual_solvent_analysis_2025_usp_467_chp_0861_5994_9212en_agilent_6d8ba4952b.pdf">Residual Solvents Analysis Based on the 2025 USP &lt;467&gt; and Chinese Pharmacopoeia (ChP 0861)</a><ul><li>Aplikace</li></ul>

Pozvánka na webinář Nové plynové chromatografy Agilent 8890B a Agilent 8860B

<h3>Objevte možnosti mikrovlnné syntézy s <a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://labrulez.com/cs-cz/all/products/1357">Anton Paar Monowave</a></h3>Chcete zkrátit reakční časy, přesně kontrolovat reakční podmínky a efektivněji optimalizovat chemické syntézy?Přijďte na odborný seminář Anton Paar zaměřený na moderní mikrovlnnou syntézu a reaktory Monowave. Ukážeme vám, jak lze mikrovlnný ohřev využít při organických i anorganických syntézách, vývoji nových postupů i optimalizaci stávajících metod. Seminář se bude konat 24. listopadu 2026 v Praze od 10. hodin.<h4>Co vás čeká:</h4><h5>Mikrovlnná syntéza v praxi</h5><ul><li>Princip mikrovlnného ohřevu a jeho výhody oproti konvenčnímu ohřevu.</li></ul><h5><a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://labrulez.com/cs-cz/all/products/1357">Anton Paar Monowave</a></h5><ul><li>Možnosti moderních mikrovlnných reaktorů a jejich využití v laboratoři.</li></ul><h5>Reakce pod kontrolou</h5><ul><li>Přesné řízení teploty, tlaku, času a dalších klíčových parametrů.</li></ul><h5>Rychlejší vývoj metod</h5><ul><li>Optimalizace chemických reakcí, screening podmínek a vývoj nových syntetických postupů.</li></ul><h5>Praktická ukázka</h5><ul><li>Podíváme se také přímo na přípravu a průběh mikrovlnné syntézy s reaktorem Monowave.</li></ul><h4>Ušetřete čas při chemické syntéze</h4>Mikrovlnný ohřev může výrazně zkrátit reakční časy a současně nabídnout přesnou kontrolu podmínek reakce. Přijďte se podívat, jak tuto technologii využít i ve vaší laboratoři.<h4>Pro koho je seminář určen?</h4><ul><li>Pro laboratorní pracovníky, analytiky a specialisty zabývající se prvkovou analýzou.</li></ul><blockquote>👉<a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://www.anton-paar.com/cz-cs/servis-podpora/seminare/detail/event/mikrovlnny-rozklad/">REGISTRACE</a>Konec registrace: 19. 11. 2026Bez poplatku. <i style="color:rgb(24, 26, 30);font-family:&quot;Roboto Flex&quot;, system-ui, -apple-system, &quot;Segoe UI&quot;, Roboto, &quot;Helvetica Neue&quot;, &quot;Noto Sans&quot;, &quot;Liberation Sans&quot;, Arial, sans-serif, &quot;Apple Color Emoji&quot;, &quot;Segoe UI Emoji&quot;, &quot;Segoe UI Symbol&quot;, &quot;Noto Color Emoji&quot;;font-size:15px;font-weight:400;letter-spacing:normal;text-align:start;text-indent:0px;text-transform:none;">Občerstvení a oběd jsou zajištěny.</blockquote><ul><li>Místo konání: Nagano Park IV, K Červenému dvoru 3269/25a, Praha 3, 130, Česko</li><li>Počet účastníků: 12</li><li>Jazyk: čeština</li></ul><h4>Přednášející:</h4><ul><li>Ing. Marek Rapta</li></ul><h4>Kontaktní osoba</h4><ul><li>Eva Perlikova</li><li>Tel.: +420778099300</li><li>eva.perlikova[at]anton-paar.com</li></ul><h4>Další semináře Anton Paar, kterých se můžete zúčastnit:</h4><a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://labrulez.com/cs-cz/all/events/1332">Ukázka měření velikosti a tvaru částic od nanometru až po jednotky milimetru</a><ul><li>25. listopadu 2026</li></ul><img src="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/Anton_Paar_seminare_e4f855a592.jpg" alt="Anton Paar: Odborné semináře" srcset="https://storage.googleapis.com/labrulez-bucket-strapi-h3hsga3/thumbnail_Anton_Paar_seminare_e4f855a592.jpg 156w," sizes="100vw" width="2048" height="2048">

Pozvánka na seminář Anton Paar - Chemická syntéza pod kontrolou: Mikrovlnné reaktory Anton Paar Monowave

Webináře

Akademie

Video

Článek

Nejbližší akce

Je autorizovaným distributorem společnosti Agilent Technologies pro Českou republiku v oblastech chromatografie (GC, HPLC, UHPLC, kapilární elektroforéza) a hmotnostní spektrometrie (GC/MS, LC/MS, CE/MS), disolučních aparátů, molekulární (UV-Vis, UV-Vis-NIR, fluorescence, FTIR analyzátory a mikroskopy) a atomové spektroskopie (ICP-OES, ICP-MS, AAS), a v neposlední řadě také v oblasti molekulární biologie a genomiky (analýza nukleových kyselin a proteinů, microarray skenery a skla, PCR & RT-PCR, qPCR, řešení pro NGS, reagencie pro mutagenezi a klonování, sondy FISH a další).

Altium International

Společnost Phenomenex je celosvětovým technologickým lídrem, který se zabývá vývojem nových řešení v oblasti analytické chemie, jež řeší požadavky analytiků na separace a purifikace v průmyslových, vládních a akademických laboratořích.

Phenomenex

Anton Paar vyvíjí, vyrábí a distribuuje vysoce přesné laboratorní přístroje a procesní měřicí systémy a nabízí uživatelsky specifická řešení automatizace a robotizace.

Anton Paar

Analýza fragmentu rHGH nebo AOD-9604 (LC-MS + CHNS)

Analýza fragmentu rHGH 176–191 a AOD-9604 pomocí LC-MS, CHNS a HPLC. Stanovení identity, množství, čistoty peptidu a screening kontaminace.

Analýza je určena k identifikaci a stanovení množství a čistoty fragmentu rekombinantního lidského růstového hormonu rHGH 176–191 a peptidu AOD-9604. Kombinuje metody LC-MS, CHNS a HPLC, které poskytují informace o identitě peptidu, jeho čistém obsahu, peptidové čistotě a případné kontaminaci jinými peptidy nebo degradačními produkty.Metoda umožňuje detekovat a stanovit obě cílové látky. Není proto nutné předem přesně vědět, zda vzorek obsahuje fragment rHGH 176–191, nebo AOD-9604.<h4>Fragment rHGH 176–191</h4>Fragment rHGH 176–191, označovaný také jako somatropin 176–191, je peptid odpovídající aminokyselinám 176 až 191 lidského růstového hormonu. Skládá se ze 16 aminokyselin a představuje C-koncovou část molekuly HGH.Jeho molekulová hmotnost je přibližně 1 799 Da. Od AOD-9604 se liší první aminokyselinou v sekvenci.<h4>AOD-9604</h4>AOD-9604 je synteticky modifikovaný peptid odvozený od fragmentu lidského růstového hormonu 176–191. Stejně jako fragment rHGH obsahuje 16 aminokyselin, avšak na začátku sekvence obsahuje tyrosin namísto fenylalaninu.Tento strukturní rozdíl umožňuje oba peptidy rozlišit pomocí LC-MS. Molekulová hmotnost AOD-9604 je přibližně 1 815 Da.<h4>Použité analytické metody</h4><h5>LC-MS – identifikace a screening kontaminace</h5>LC-MS se používá k potvrzení identity analyzovaného peptidu. Zároveň poskytuje screening přítomnosti jiných peptidů a degradačních produktů, které lze danou metodou detekovat.<h5>CHNS – stanovení čistého obsahu peptidu</h5>Elementární analýza CHNS stanovuje obsah uhlíku, vodíku, dusíku a síry ve vzorku. Na základě naměřených hodnot lze vypočítat čistý obsah peptidu neboli Net Peptide Content.Protože je vzorek při CHNS analýze spalován, výsledek není ovlivněn problémy s rozpustností, které mohou komplikovat stanovení množství pomocí kapalinové chromatografie.<h5>HPLC – stanovení peptidové čistoty</h5>HPLC se používá ke stanovení peptidové čistoty a relativního zastoupení hlavní peptidové složky vůči chromatograficky detekovatelným nečistotám.<h4>Co analýza stanovuje</h4><ul><li>Identitu fragmentu rHGH 176–191 nebo AOD-9604</li><li>Množství peptidu ve vzorku</li><li>Čistý obsah peptidu pomocí CHNS</li><li>Peptidovou čistotu pomocí HPLC</li><li>Přítomnost jiných peptidů nebo degradačních produktů pomocí LC-MS</li><li>Rozlišení mezi fragmentem rHGH 176–191 a AOD-9604</li></ul><h4>Parametry analýzy</h4><ul><li>Cílové látky: fragment rHGH – somatropin 176–191 a AOD-9604</li><li>CAS číslo AOD-9604: 221231-10-3</li><li>Molekulová hmotnost AOD-9604: 1 815 Da</li><li>Sekvence AOD-9604: H-Tyr-Leu-Arg-Ile-Val-Gln-Cys(1)-Arg-Ser-Val-Glu-Gly-Ser-Cys(1)-Gly-Phe-OH</li><li>CAS číslo fragmentu rHGH: 66004-57-7</li><li>Molekulová hmotnost fragmentu rHGH: 1 799 Da</li><li>Sekvence fragmentu rHGH: H-Phe-Leu-Arg-Ile-Val-Gln-Cys(1)-Arg-Ser-Val-Glu-Gly-Ser-Cys(1)-Gly-Phe-OH</li><li>Metoda identifikace: LC-MS</li><li>Metoda stanovení množství: CHNS</li><li>Metoda stanovení peptidové čistoty: HPLC</li><li>Mez detekce: méně než 1/20 obvyklé dávky v lahvičce</li><li>Výsledný formát pro lyofilizovaný vzorek: mg/lahvičku a peptidová čistota</li><li>Alternativní výsledný formát: čistota m/m a peptidová čistota</li><li>Minimální množství lyofilizovaného vzorku: 1 celá neotevřená lahvička s lyofilizátem</li><li>Minimální množství API ve formě prášku: 30 mg v uzavřené skleněné lahvičce, která chrání vzorek před absorpcí vlhkosti</li><li>Průměrná doba zpracování: 7 pracovních dnů</li></ul><blockquote><h5>Důležité upozornění</h5>Alternativní výsledný formát vyjádřený jako čistota m/m je určen pouze pro surové API ve formě prášku. U lyofilizovaných vzorků se standardně uvádí množství peptidu v mg/lahvičku a peptidová čistota.</blockquote><h4>Doplňkové analýzy</h4><h5>Analýza TFA</h5><ul><li>Detekce a stanovení množství kyseliny trifluoroctové (TFA) ve vzorku. Výsledek je uváděn v mg/lahvičku.</li></ul><h5>Kompletní nezpracovaná data</h5><ul><li>Poskytnutí dostupných nezpracovaných analytických dat z hlavního testu i ze všech objednaných doplňkových analýz, pokud jsou pro danou metodu k dispozici.</li></ul><h5>Analýza přítomnosti fentanylu</h5><h5>Alternativní výsledný formát – čistota m/m</h5><ul><li>Alternativní vyjádření výsledku jako hmotnostní čistota m/m. Tato možnost je určena výhradně pro surové API ve formě prášku.</li></ul><h5>Test variability</h5>Analýza více kusů vzorku za účelem posouzení variability v rámci jedné šarže. Všechny dodané vzorky musí pocházet ze stejné šarže stejného produktu.<h5>Měření pH</h5><h5><a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.cz/products/2522">Analýza endotoxinů</a></h5><ul><li>Stanovení přítomnosti bakteriálních endotoxinů, zejména lipopolysacharidů (LPS). Test je dostupný pouze pro hotové produkty a není určen pro surové práškové vzorky.</li><li>Standardní test poskytuje přesné výsledky do 10 EU/lahvičku. Vyšší hodnoty jsou odhadované a pro jejich přesné stanovení je nutné další měření s upraveným ředěním. Doporučuje se proto zaslat dvě lahvičky.</li><li>Pokud je předem očekávána hodnota vyšší než 10 EU/lahvičku, lze metodu od začátku přizpůsobit vyššímu rozsahu.</li></ul><h5>Dodatečný protokol</h5><ul><li>Vystavení samostatného dodatečného protokolu s jiným jménem klienta.</li></ul><h5><a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://lcms.cz/products/2527">Testování sterility</a></h5><ul><li>Testy TAMC a TYMC kontrolují přítomnost bakterií, kvasinek a plísní v produktu. Pro analýzu je nutné zaslat další neotevřené kusy vzorku. Průměrná doba zpracování testu je 14 dnů.</li></ul><h5><a target="_blank" rel="noopener noreferrer" href="https://icpms.cz/products/2525">Analýza těžkých kovů</a></h5><ul><li>Stanovení přítomnosti arsenu, kadmia, olova a rtuti ve vzorku. Analýzu dalších kovů lze řešit individuálně.</li></ul>

CHNS elementární analýza (samostatný test)

CHNS elementární analýza stanovuje obsah C, H, N a S a umožňuje nezávislé vyhodnocení skutečného obsahu peptidu ve vzorku.

<div><section><div><div><div><div><div><div><div><section><div><div><div><div><div><div>CHNS elementární analýza je samostatný test určený ke stanovení obsahu uhlíku (C), vodíku (H), dusíku (N) a síry (S) ve vzorku. U peptidových vzorků lze CHNS analýzu využít jako nezávislý způsob stanovení čistého obsahu peptidu.Na rozdíl od stanovení množství pomocí HPLC je CHNS analýza založena na spalování vzorku, nikoli na jeho rozpouštění. Tím lze eliminovat problémy související s rozpustností, které mohou ovlivňovat některá chromatografická měření.</div></div></div></div></div></div></section></div></div></div></div></div></div></div></section></div><h4>CHNS elementární analýza</h4>CHNS elementární analýza stanovuje zastoupení uhlíku, vodíku, dusíku a síry ve vzorku. Během analýzy je vzorek spálen a následně je stanoveno jeho elementární složení.U peptidů se známým elementárním složením lze získaná data využít k vyhodnocení čistého obsahu peptidu ve vzorku nezávisle na chromatografickém stanovení čistoty.<h4>Klíčové vlastnosti</h4><ul><li>Samostatná CHNS elementární analýza</li><li>Stanovení uhlíku, vodíku, dusíku a síry</li><li>Analytická metoda založená na spalování vzorku</li><li>Nezávislé stanovení čistého obsahu peptidu</li><li>Eliminace problémů s rozpustností vzorku, které mohou ovlivnit některá HPLC měření</li><li>Vhodné pro tablety, kapsle, kapalné roztoky, raw materiály a vialky</li><li>Minimální množství vzorku 1 tableta/kapsle, 1 ml roztoku, 200 mg raw materiálu nebo 1 vialka</li><li>Průměrná doba zpracování 7 pracovních dnů</li></ul><h4>Parametry analýzy</h4><ul><li>Analytická metoda: CHNS elementární analýza</li><li>Požadované množství vzorku: 1 tableta/kapsle, 1 ml roztoku, 200 mg raw materiálu nebo 1 vialka</li><li>Průměrná doba zpracování: 7 pracovních dnů</li></ul><blockquote>Důležité upozornění:<ul><li>CHNS elementární analýza stanovuje elementární složení vzorku a zásadně se liší od chromatografického stanovení čistoty.</li></ul></blockquote><h4>Doplňkové analýzy</h4>K hlavní analýze lze objednat následující doplňkové laboratorní služby:<ul><li>Doplňkový laboratorní protokol</li></ul>

Produkty z kategorie Laboratorní rozbory zaměřené na Elementární analýza - strana 1

Mohlo by Vás zajímat

Pozvánka na webinář Nové plynové chromatografy Agilent 8890B a Agilent 8860B

Pozvánka na seminář Anton Paar - Chemická syntéza pod kontrolou: Mikrovlnné reaktory Anton Paar Monowave

Jak číst HPLC chromatogram: Podrobný průvodce interpretací výsledků