REGULATED MYCOTOXINS IN CEREAL GRAIN FLOURS: A SIMPLIFIED SAMPLE PREPARATION AND LC-MS/MS METHOD

Význam tématu

Nadměrný výskyt mykotoxinů v obilninách představuje významné zdravotní a ekonomické riziko. Spolehlivá a citlivá analýza je proto nezbytná pro dodržení regulačních limitů a zajištění bezpečnosti potravin.

Cíle a přehled studie

Studie se zaměřila na vývoj zjednodušené diluční injekční metody pro stanovení evropsky regulovaných mykotoxinů v moukách z pšenice, ovsa, kukuřice, rýže a dalších surovin. Validace byla provedena podle nařízení EU 5192014 a doporučení SANTE120892016.

Použitá metodika a instrumentace

• Příprava vzorku: mouka promíchaná s 13C označenými interními standardy a extrakce v kyselé směsi acetonitril voda
• Separace: odstředění při 5300g a sběr supernatantu, následná diluce vzorku v kyselé vodě v poměru 1:10 a přímá injekce
• Instrumentace: kapalinový chromatograf ACQUITY I Class FL spojený s triple kvadrupólovým hmotnostním spektrometrem Xevo TQ XS v režimu MRM
• Validace: ověřování LOD a LOQ dle pokynů Eurachem a regresní kalibrace s koeficienty determinace nad 0.994

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda prokázala vynikající citlivost i opakovatelnost. Instrumentální limity detekce se pohybovaly v rozsahu femtogramů až jednotek pikogramů na kolonu. Matriční efekty byly významné – od tlumení u nivalenolu až po zesílení signálu u ochratoxinu A – což potvrdilo přínos 13C interních standardů. Recoveries při třech úrovních dopingů dosáhly 90 až 115 procent a relativní rozptyl byl v každém případě pod 10 procent.

Přínosy a praktické využití metody

• Zkrácení a zjednodušení přípravy vzorku bez nutnosti rozsáhlých očistných kroků
• Současné stanovení více tříd mykotoxinů s vysokou selektivitou a citlivostí
• Kompenzace matričních efektů pomocí 13C interních standardů a možnost kalibrace v roztoku bez nutnosti matričně vázaných standardů

Budoucí trendy a možnosti využití

Další směřování zahrnuje rozšíření spektra analyzovaných kontaminantů včetně emerging mykotoxinů, plnou automatizaci přípravy vzorku a použití pokročilé datové analýzy nebo umělé inteligence pro optimalizaci výsledků a predikci rizik.

Závěr

Navržená diluční injekční metoda splňuje požadavky EU regulace pro kvantitativní stanovení regulovaných mykotoxinů v moukách obilovin. Díky jednoduché přípravě vzorku a použití 13C interních standardů je vhodná pro rutinní analytické laboratoře zabývající se kontrolou kvality potravin.

Reference

1. Commission Regulation EU 5192014 on sampling and performance criteria for T2 HT2 and citrinin 2014
2. Guidance on identification of mycotoxins in food and feed SANTE120892016 2017
3. The Fitness for Purpose of Analytical Methods A Laboratory Guide to Method Validation and Related Topics Eurachem 2014