Characterization and isolation of quinones from Tectona grandis Linn. leaves using innovative hyphenation of TLC-MS interface with LC/MS/MS system

Význam tématu

Listy Tectona grandis Linn. (sagwan, teak) obsahují barevné chinony s potenciální biologickou aktivitou. Jejich rychlá a přesná identifikace přispívá k rozvoji přírodních produktů, farmaceutických aplikací i kontrole kvality.

Cíle a přehled studie

Hlavním cílem bylo izolovat a charakterizovat chinony z listů T. grandis pomocí inovativního propojení tenkovrstvé chromatografie (HPTLC) s hmotnostní spektrometrií (LC/MS/MS) prostřednictvím rozhraní TLC-MS.

Použitá metodika a instrumentace

Vzorek suchých mletých listů extrahovaný v kyselém prostředí byl aplikován na přednástřikové HPTLC desky ze siliky gelu 60 F254. Chromatografické rozdělení proběhlo ve dvou vývojích s mobilními fázemi na bázi PET-éteru, ethylacetátu a kyseliny mravenčí. Extrakce z barevných pásem zajišťovalo rozhraní TLC-MS (CAMAG) pracující v poloa­utomatickém režimu. Separované zóny byly přivedeny přímo do Nexera UHPLC s trojkvadrupólovým LCMS-8040 (Shimadzu) s duálním ionizačním zdrojem (DUIS) ve skenovacím režimu Q3.

Hlavní výsledky a diskuse

Na HPTLC desce bylo detekováno šest dobře rozlišených pásů. Detailní analýza třetího pásu (Rf 0,26) odhalila prekurzorový ion m/z 227 odpovídající deoxylapacholu. Při kolizních energiích do −45 V byly získány fragmenty m/z 57, 136, 159, 163 a 186 potvrzující strukturu naphthoquinonu. Metoda dovolila simultánní skenování v pozitivním i negativním režimu a optimalizaci závislosti fragmentů na napětích.

Přínosy a praktické využití metody

• Rychlý online přenos analyzovaných pásem z TLC do MS bez manuálních kroků
• Vysoká selektivita a citlivost v identifikaci přírodních látek
• Potenciál pro využití v klinické analytice, farmaceutickém vývoji a QA/QC

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se rozšíření hyphenace TLC-MS na další přírodní extrakty i syntetické směsi, vylepšení automatizace polohy extrakce, kombinace s detekcí UV/VIS a rozvoj kvantitativních přístupů pro rychlé skrínování.

Závěr

Inovativní spojení HPTLC s LC/MS/MS pomocí CAMAG TLC-MS interface a Shimadzu Nexera LCMS-8040 nabízí účinný nástroj pro rychlou, přesnou a šetrnou izolaci a identifikaci chinonů z listů Tectona grandis. Tento přístup otevírá nové možnosti v oblasti analýzy přírodních produktů a farmaceutického vývoje.

Reference

1. N. Nayeem, M. Karvekar, The International Journal of Pharmacology, 8(1), 2010.
2. R. Lacret, R. Varela Rosa, Journal of Chemical Ecology, 37, 2011, 1341–1348.