Analysis of Fat-soluble Vitamins Using the Nexera™ UC Supercritical Fluid Chromatograph

Význam tématu

Analytická detekce vitamínů rozpustných v tucích je klíčová pro zajištění kvality potravin a doplňků stravy a pro prevenci zdravotních rizik spojených s jejich deficitem či nadbytkem.

Cíle a přehled studie

Studie představuje simultánní analýzu čtyř skupin vitamínů (A, D, E, K) pomocí superkritické fluidní chromatografie (SFC) kombinované s triple kvadrupólovou hmotnostní spektrometrií (MS/MS) v režimu MRM.

Použitá metodika a instrumentace

Metoda využívá následující podmínky chromatografie:

• Kolona Shim-pack UC-RP 150 × 2,1 mm, 3 μm
• Mobilní fáze: superkritický CO2 (fáze A) a methanol s 0,1 % (hm.) formiátem amonným (fáze B)
• Gradient: 5 % B (0 min) → 10 % (6 min) → 30 % (10 min) → 50 % (10,1–15 min) → 5 % (15,1–18 min)
• Průtok 0,8 mL/min, teplota kolony 40 °C, tlak BPR 10 MPa
• Injekce 1 μL, makeup methanol s formiátem amonným 0,05 mL/min

Instrumentace:

• Systém Nexera UC SFC
• LCMS-8050 triple kvadrupól (ESI+, MRM)

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda umožnila separaci 20 vitamínů a jejich prekurzorů do 15 minut s vysokou citlivostí. Linearita kalibračních křivek dosahovala R2 > 0,995 v rozsahu 0,01–10 μmol/L. Meze detekce se pohybovaly od 0,4 nmol/L (β-karoten) do 47 nmol/L (ergokalciferol). Opakovatelnost retence i plochy píků byla pod 5 % RSD. Analýza extraktu doplňku prokázala přítomnost cholekalciferolu a menaquinonu a test špikováním ukázal návratnost 94,6–106 %.

Přínosy a praktické využití metody

• Rychlá a vysoce selektivní multikomponentní analýza
• Vysoká citlivost vhodná pro kontrolu kvality potravin a doplňků
• Robustnost a reprodukovatelnost pro rutinní provoz

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se rozšíření spektra analyzovatelných vitamínů a jejich metabolitů, integrace s automatizovanými vzorkovači a využití v klinické diagnostice pro monitoring stavu výživy pacientů.

Závěr

Popsaná SFC-MS/MS metoda nabízí efektivní nástroj pro komplexní analýzu vitamínů rozpustných v tucích s vynikajícími analytickými parametry a širokým uplatněním v potravinářském i farmaceutickém průmyslu.

Reference

1. H. Terada, T. Hattori Application No. C191, Shimadzu Corporation, First Edition May 2019