Can I Really Enjoy the Benefits of the Latest LC Column Technology?

Význam tématu

V moderních laboratořích se klade důraz na vyšší kapacitu analýz, kratší dobu měření, nižší náklady a lepší využití stávajících zdrojů. Inovativní technologie LC kolon umožňují zkrátit časy separací, zlepšit rozlišení a prodloužit životnost kolony, aniž by bylo nutné zásadně měnit metodiky.

Cíle a přehled studie

Cílem prezentovaného materiálu bylo demonstrovat výhody použití superficially porous částic (SPP) Poroshell 120 v různých velikostech a chemistriích. Studie popisuje, jak tyto kolony vyhovují potřebám laboratoří i organizací, a přináší kvantifikované srovnání s klasickými plně porézními částicemi.

Použitá metodika a instrumentace

Pro hodnocení byly využity:

• Principy toku a pressure drop (Kozeny–Carmanova rovnice)
• Van Deemterova analýza účinnosti (A, B, C termy)
• Porovnání 1,8 µm TPP vs. 2,7 a 4 µm SPP kolony z hlediska tlaku a rozlišení
• Testy životnosti při znečištěných vzorcích (např. zelený čaj, Similac)
• Vliv pH a modifikace hmotnostního přenosu (HPH chemistrie)

Instrumentace: běžné HPLC a UHPLC systémy (např. Agilent Infinity 1290), běžné detekční moduly LC-UV/MS a upravené těsnění a filtry pro práci v pH rozsahu 1–12,5.

Hlavní výsledky a diskuse

• Kolony 4 µm SPP nabízejí dostatečně nízký tlak (<200 bar) pro HPLC i UHPLC přístroje s vysokou účinností (cca 90 % účinnosti 1,8 µm TPP).
• Při průtoku 2 mL/min dosahují rozlišení Rs 2,5 (4 µm), 2,7 (2,7 µm) a až 3,1 (1,8 µm) za nižšího tlaku.
• Řešení nízkého zpoždění a disperze umožňuje rychlé metody s ostrými špičkami, zejména na úzkých (2,1 mm) kolónách.
• Testy životnosti prokázaly stabilní účinnost i po 1 800 injekcích nezředěného zeleného čaje; výměna levného guardu prodlužuje životnost hlavní kolony.
• Implementace HPH chemistrie rozšiřuje pH stabilitu až na 10–12,5 s minimálním opotřebením.
• Model ROI ukázal 160 % roční návratnost investice díky úsporám času, fází a metodického vývoje.

Přínosy a praktické využití metody

• Možnost provozu na jakémkoli HPLC/UHPLC bez rozšířených investic do přístrojů.
• Zkrácení doby běhu až o 40 % se srovnatelným nebo lepším rozlišením.
• Nižší spotřeba mobilní fáze, menší provozní náklady a rychlejší návratnost.
• Prodlužování životnosti kolony díky robustním částicím, chemistrii HPH a 2 µm fritám.
• Široký výběr 12 selektivit (C18, C8, PFP, HILIC aj.) pro optimalizaci metod.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Další rozšíření SPP technologií s menšími částicemi a novými chemistriemi.
• Rostoucí aplikace vysokého pH v LC–MS analýzách cílených i nestrukturovaných povah.
• Integrace SPP kolón do automatizovaných a on-line systémů pro průmyslovou QA/QC.
• Využití ve vysoce průtokových a mikroprůtokových konfiguracích pro biofarmaceutické a metabolomické studie.

Závěr

Poroshell 120 SPP kolony kombinují nízký tlak, vysokou účinnost a dlouhou životnost s širokou nabídkou selektivit. Umožňují laboratořím dosáhnout rychlých, vysoce rozlišujících a ekonomicky výhodných LC analýz bez nutnosti rozsáhlých investic do nové instrumentace.

Reference

• Luke S. Can I Really Enjoy the Benefits of the Latest LC Column Technology? Agilent Technologies, 2016.