Global round robin test of thiopental EP method performance on identical HPLC systems

Význam tématu

Vysoká systémová reprodukovatelnost HPLC je klíčová pro rutinní metody v kontrolních laboratořích, kde vedle sebe pracuje více identických přístrojů. Spolehlivé a predikovatelné výsledky umožňují efektivní transfer metod mezi výzkumem a kontrolou kvality.

Cíle a přehled studie / článku

• Hodnocení variability mezi identickými HPLC systémy za kontrolovaných podmínek.
• Prezentace intra- a interlaboratorní přesnosti pro časy zadržení, plochy píků a relativní kvantifikaci.
• Vyhodnocení vlivu přípravy vzorku, eluentu a šarží kolon na výsledky.

Použitá metodika a instrumentace

• Metoda založená na monografii European Pharmacopoeia pro thiopental a související nečistoty.
• Příprava standardu: 2 mg EP referenčního materiálu do 2 mL mobilní fáze (1 mg/mL s minoritními nečistotami A–D).
• Mobilní fáze: 1 g kyseliny fosforečné (85%) doplněné vodou na 1 L, smíchané se 350 mL acetonitrilu.
• Kolona Thermo Scientific Hypersil GOLD C18 (150 × 4,6 mm, 5 µm), izokratický režim 65:35 (1 g/L H3PO4 : ACN).
• Provozní podmínky: průtok 1 mL/min, teplota kolony 25 °C, teplota autosampleru 4 °C, detekce UV při 225 nm.
• Instrumentace: Vanquish Core Quaternary i Binary systémy, Split Sampler CT, Column Compartment C, UV-VIS detektory (DAD/VWD), Chromeleon CDS 7.3.

Hlavní výsledky a diskuse

• Kontrolovaný test na třech identických systémech přinesl RSD retenčních časů 0,4 % a RSD ploch piků pod 2,3 % pro čtyři z pěti analyzovaných píků.
• Globální test osmi systémů ve čtyřech zemích potvrdil splnění kritérií system suitability (RS ≥ 1,5) a velmi podobné relativní retenční časy s drobnými odchylkami vlivem specifik kolony.
• Retenční časy byly významně ovlivněny přípravou eluentu spíše než šarží kolony nebo typem pumpy.
• Přesnost plochy piků úzce závisela na homogenitě vzorku; malé píky s nižším poměrem signál/šum vykazovaly vyšší RSD.
• Autosampler prokázal RSD 0,05–0,15 % u větších píků, rozdíly mezi quaternary a binary pumpou nebyly významné při izokratickém chodu.

Přínosy a praktické využití metody

• Výborná predikovatelnost výkonu mezi přístroji usnadňuje transfer a validaci metod.
• Metoda plně vyhovuje požadavkům European Pharmacopoeia pro analýzu thiopentalu a jeho nečistot.
• Robustní provoz s minimálními úpravami nastavení a opakovanými kalibracemi.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Automatizace přípravy vzorků a eluentu ke snížení variability.
• Online propojení více HPLC systémů pro centralizované monitorování kvality.
• Rozšíření přístupu na další farmaceutické sloučeniny podle monografií EP.
• Využití inteligentních algoritmů pro predikci a kompenzaci systémových odchylek.

Závěr

Studie potvrdila mimořádnou systémovou reprodukovatelnost Vanquish Core HPLC systémů pro časy zadržení i plochy píků. Klíčové faktory ovlivňující výsledky jsou příprava eluentu a homogenita vzorku. Přístroje poskytují konzistentní data v souladu s požadavky European Pharmacopoeia.

Reference

1. European Pharmacopoeia 9.0 Monografie Thiopental sodium and sodium carbonate 07/2012:0212.
2. EP Certified Reference Standard Thiopental for System Suitability CRS Thermo Fisher Y0001478.
3. Comparison Guide to C18 Reversed Phase HPLC Columns MacMod Analytical Inc Fourth Edition 2008.