LC/HRMS, LC/MS, LC/MS/MS, LC/Orbitrap
ZaměřeníVýrobceThermo Fisher Scientific
Význam tématu
Moderní analytická chemie vyžaduje přístroje spojující vysoké rozlišení, přesnost a rychlost měření s jednoduchou obsluhou a spolehlivostí. Orbitrap Exploris 480 nabízí ultravysoce polem charakterizovaný Orbitrap hmotnostní analyzátor, pokročilou iontovou optiku a intuitivní software, což umožňuje získávat kvalitní data od malých molekul po intact proteiny, a to s vysokou výtěžností vzorků a minimálními prostojem.
Cíle a přehled článku
Specifikace popisují klíčové vlastnosti Orbitrap Exploris 480: konstrukci iontové dráhy, softwarovou a hardwarovou výbavu, výkonové parametry, režimy akvizice a dostupné volitelné moduly. Cílem je představit parametry přístroje, jeho provozní možnosti a přínosy pro široké spektrum aplikací v analytické chemii.
Použitá metodika a instrumentace
Hlavní komponenty a jejich funkce:
- OptaMax NG iontový zdroj s HESI sondou a kalibračním rozprašovačem pro přesné dávkování vzorků od 1 µL/min do 1000 µL/min
- Atmosférický tlakový API interface s vysokokapacitní transferní trubicí (HCTT) a elektrodynamickou iontovou trychtýří (EDIF) pro vysokou citlivost a efektivní odvod rozpouštědla
- Pokročilý aktivní vedení svazku (AABG) a segmentovaný kvadrupól s proměnnou šířkou izolace (AQT) pro selektivní výběr prekurzorových iontů
- Iontové trasovací multipóly (IRM) pro zachytávání iontů a kolizní disociaci (HCD) s volbou absolutní nebo normalizované kolizní energie
- Ultravysoce polem charakterizovaný Orbitrap analyzátor s centrálním elektrodem 4 kV, dosažitelným rozlišením až 480 000 (@ m/z 200) a masovou přesností <1 ppm při interní kalibraci
- Víceúrovňová vakuová soustava se šesti regiony a hliníkovými komorami pro optimalizaci tlakových poměrů
- Softwarové prostředí Xcalibur, Orbitrap Exploris ovládací software a volitelné balíčky Proteome Discoverer, BioPharma Finder, Compound Discoverer
- Volitelné moduly: FAIMS Pro pro selektivní separaci iontů na plynové fázi, BioPharma option pro analýzu »intact« proteinů až do m/z 8000, EASY-IC interní kalibrace
Hlavní výsledky a diskuse
Výkonové parametry a akviziční režimy:
- Mass range: m/z 40–6000 (až 8000 s BioPharma option)
- Rozlišení: až 480 000 při m/z 200
- Snímkovací rychlost: až 40 Hz při nastavení rozlišení 7500
- Masová přesnost: externí kalibrace <3 ppm RMS/24 h, interní <1 ppm RMS/24 h
- Citlivost: S/N 100:1 (50 fg reserpine, MS/MS), S/N 150:1 (50 fg reserpine, SIM)
- Dynamický rozsah: >5000 v jediném spektru
- Přepínání polarity: plný cyklus >1,4 Hz pro pozitivní/negativní režim
- Multiplexing: až 20 prekurzorů za sken
- Režimy akvizice: Full scan, SIM, AIF, DDA (TopN/Top Speed), DIA, PRM
- Inteligentní funkce: TurboTMT (ΦSDM), Advanced Peak Determination, rozmanité datové filtry (Dynamic Exclusion, MIPS, Precursor Fit aj.)
Přínosy a praktické využití metody
Orbitrap Exploris 480 umožňuje vědcům:
- Dosahovat vysoké kvality dat díky HRAM selektivitě a nízkému šumu
- Zrychlit analýzy a zvýšit propustnost vzorků díky automatizaci ladění a drag-and-drop metodám
- Provádět komplexní proteomické i metabolomické studie
- Implementovat multiatributové metody (MAM) v biopharmaceutickém průmyslu
- Realizovat analýzu malých molekul, peptidů, intact proteinů i jejich komplexů
Budoucí trendy a možnosti využití
Další směřování zahrnuje:
- Integraci strojového učení pro optimalizaci metod a zpracování dat
- Rozvoj rychlejších dekonvolučních algoritmů a online kalibrace v reálném čase
- Širší nasazení FAIMS a iontové mobility pro hlubší frakcionaci vzorků
- Pokročilé možnosti multiplexního značení (TMT) a top-down proteomiky
- Další automatizace workflow ve spojení se správou laboratoří typu LIMS
Závěr
Orbitrap Exploris 480 představuje vyspělou platformu spojující špičkový Orbitrap analyzátor, flexibilní iontovou optiku a uživatelsky přívětivý software. Přístroj poskytuje vysokou přesnost, rozlišení a propustnost, a to pro široké spektrum analytických úloh od QC až po komplexní výzkumné aplikace.
Reference
1. Thermo Scientific Tribrid mass spectrometers, Thermo Scientific TSQ Altis, TSQ Quantis a TSQ Fortis mass spectrometers.
Obsah byl automaticky vytvořen z originálního PDF dokumentu pomocí AI a může obsahovat nepřesnosti.