Automated workflow for the determination of fatty acid methyl esters (FAME) in fat and fat containing food samples using a 90 sec. transesterification

Význam tématu

Analýza mastných kyselin ve formě metylesterů (FAME) je klíčová pro hodnocení kvality potravin, dodržování legislativy a monitorování zdravotních rizik spojených se složením tuků. Automatizace tohoto procesu zvyšuje bezpečnost laboratoře, minimalizuje chybovost a výrazně zkracuje dobu analýzy.

Cíle a přehled studie / článku

Studie popisuje plně automatizovaný postup na platformě PAL RTC pro transesterifikaci a kvantifikaci FAME v tucích a potravinových vzorcích obsahujících tuk. Cílem bylo ověřit rychlost, spolehlivost a stabilitu metody při analýze různých olejů a živočišných tuků.

Použitá metodika a instrumentace

Metoda využívá transesterifikaci triglyceridů pomocí roztoku methoxidu sodného v metanolu při pokojové teplotě (reakční doba 90 s). Automatizační stanice je vybavena:

• dilutorovým modulem pro přesné dávkování NaOCH₃, heptanu, vody a čisticího roztoku,
• vortex modulem pro rychlé promíchání a extrakci,
• syringe modulem (10 μl) pro vstřik GC,
• softwarovým režimem „prep ahead“ pro překrývanou přípravu a analýzu vzorků.

Hlavní výsledky a diskuse

Automatizovaný postup zpracoval 50 vzorků za 18 h 30 min bez oběhového přetížení. Chromatografická separace FAME zůstala stabilní i po 75 vstupech. Pomocí tří vnitřních standardů (alkanu C14:1, triglyceridu C11 a FAME-9) bylo ověřeno:

• úplné proběhnutí transesterifikace,
• nepřítomnost nežádoucí saponifikace,
• stabilitu vstřikovacího systému bez kontaminace.

Typické složení mastných kyselin se lišilo podle typu oleje: kokosový olej byl bohatý na C12:0 (45,8 %), slunečnicový na C18:2 (57,1 %), olivový dominantně obsahoval C18:1 (74,5 %).

Přínosy a praktické využití metody

Automatizace zvyšuje reprodukovatelnost, snižuje expozici personálu škodlivým chemikáliím a optimalizuje pracovní postupy v QC laboratořích, státních institucích a CRO. Umožňuje rychlé sledování složení tuků v potravinách a surovinách.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další vývoj směřuje k integraci on-line míchacích a extrakčních modulů, zkrácení doby přípravy vzorku a rozšíření o detekci stopových kontaminantů. Kombinace s hmotnostní spektrometrií by umožnila simultánní identifikaci minoritních komponent.

Závěr

Popisovaný plně automatizovaný workflow pro FAME analýzu poskytuje rychlý, spolehlivý a bezpečný postup s minimálním rizikem chyb. Jednotný software a modulární konstrukce PAL RTC dovolují adaptaci na různé typy vzorků a rozšíření metody.

Reference

1. Arens M, Schulte E, Weber K. Fat Sci Technol. 1994;96:67–68.
2. House SD, Larson PA, Johnson RR, De Vries JW, Martin DL. J Assoc Off Anal Chem Int. 1994;77:960–965.
3. Suter B, Grob K, Pacciarelli. Z Lebensm Unters Forsch A. 1997;204:252–258.
4. de Koning S, van de Meer B, Alkema G, Janssen HG, Brinkmann UT. J Chromatogr A. 2001;922:391–397.