HPLC, LC/MS, Kapilární elektroforéza, PrepLC, LC/SQ, RAMAN Spektrometrie, FTIR Spektroskopie, UV–VIS Spektrofotometrie, 2D-LC, ICP/MS, LC/MS/MS, LC/TOF, LC/HRMS, LC/QQQ, GC, GC/MSD, GC/SQ, HeadSpace, GPC/SEC, Spotřební materiál, LC kolony
ZaměřeníFarmaceutická analýza
VýrobceAgilent Technologies
Význam tématu
Peptidová terapeutika, zejména GLP-1 agonisté, jsou klíčová pro léčbu diabetu 2. typu a obezity. Přesná analýza kvality, čistoty, struktury a stability peptidových léků zajišťuje jejich bezpečnost a účinnost.
Vzrůstající poptávka po generických peptidových léčivech vyžaduje striktní dodržování farmaceutických norem (USP/ICH), což podněcuje vývoj pokročilých analytických metod.
Cíle a přehled studie
Kompendium představuje end-to-end řešení Agilent pro charakterizaci peptidek od ověření surovin až po finální kontrolu kvality. Zaměřuje se na GLP-1 agonisty, ukazuje klíčové analytické pracovní postupy, aplikační poznámky a použitá zařízení.
Použitá metodika a instrumentace
- Reverzní fázová chromatografie (RP-LC/UV, LC/MS) a LC/Q-TOF (Agilent 6545XT AdvanceBio LC/Q-TOF, 1290 Infinity II Bio 2D-LC)
- Preparativní HPLC: 1290 Infinity II preparative LC a LC/MSD
- Size-exclusion chromatografie (AdvanceBio SEC, 1290 Infinity II bio 2D-LC + InfinityLab LC/MSD XT)
- Triple quadrupole MRM kvantifikace (6495D LC/TQ)
- Electron capture dissociation (ExD cell) s ExDViewer softwarem
- Spektroskopie: Raman (Vaya Raman), FTIR (Cary 630), UV–Vis (Cary 3500), OPA derivatizace (AdvanceBio AAA)
- Automatizovaná příprava vzorků (AssayMAP Bravo)
- Datová správa: Agilent SLIMS (LIMS + ELN)
Hlavní výsledky a diskuse
- Škálování metod z analytické na preparativní RP-LC bez úprav gradientu
- Přesná lokalizace modifikací a izomerů peptidů pomocí ECD/CID a ExDViewer
- Identifikace agregátů GLP-1 analogů v 2D-LC/MS s dekonvolucí spekter
- Citlivá kvantifikace oxidovaných a nativních forem tirzepatidu (LOQ 0,025 ng/mL)
- Stability studie liraglutidu a semaglutidu v různých degradačních podmínkách
- Rychlá konfirmace intaktní hmotnosti GLP-1 analogů pomocí InfinityLab LC/MSD iQ
- Efektivní identifikace surovin pro syntézu peptidů Raman spektroskopií
Přínosy a praktické využití metody
- Komplexní end-to-end analytické workflow od surovin k finálnímu QC
- Regulační shoda podle USP <1503>, USP <467>, Ph. Eur. a FDA ANDA
- Automatizace přípravy vzorků minimalizuje chyby a zvyšuje reprodukovatelnost
- Rychlejší vývoj metod díky modulárním LC přístrojům (BlendAssist, Quick Change Valve)
- Přenositelnost metod napříč systémy a platformami
Budoucí trendy a možnosti využití
- Nasazení 2D-LC a iontové mobility pro lepší separaci izomerů
- Využití full-spektrových detektorů a AI pro automatizovanou interpretaci dat
- Hromadné automatizované platformy pro high-throughput screening
- Integrace LIMS/ELN s IoT a prediktivní údržbou laboratoře
- Vývoj nano-LC/MS a mikrofluidických systémů pro minimální spotřebu vzorku
Závěr
Komplexní portfolio analytických metod Agilent umožňuje laboratorím kontrolovat kvalitu peptidových terapeutik na všech úrovních vývoje. Díky citlivému LC/MS, spektroskopii a automatizaci přípravy vzorků lze splnit přísné regulační požadavky, zkrátit čas vývoje a zajistit bezpečnost i účinnost nových léků.
Reference
- Biological Activities of GLP-1, omicsonline.org
- Agilent aplikační poznámky 5994-6087EN, 5994-7727EN, 5994-7992EN, 5994-7500EN, 5994-7415EN, 5994-7610EN
- USP <1503> General Chapter, USP <467>, European Pharmacopoeia
Obsah byl automaticky vytvořen z originálního PDF dokumentu pomocí AI a může obsahovat nepřesnosti.
